新春36号黑小麦中硒的分布、富硒蛋白的制备及抗氧化活性研究.pdf

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3、１？Ｖ爷／；睾＇在皆、謗＇戰尹＼＇分类号：密级：公开学号：2014406005单位代码：10759石河子大学硕士学位论文新春36号黑小麦中硒的分布、富硒蛋白的制备及抗氧化活性研究学位申请人李甜指导教师张建副教授申请学位类别专业硕士专业名称工程硕士研究领域食品工程所在学院食品学院中国·新疆·石河子2016年5月DistributionofSelenium,PreparationandAntioxidantActivityofSe-enrichedProteinfromXinchunNo.3

4、6TriticaleADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofEngineeringByLiTian(FoodEngineering)DissertationSupervisor:Prof.ZhangJianMay,2016I摘要硒是人体所必需的微量元素之一，其摄入量与人体的许多代谢相关，并且与人类的健康与疾病也有密切联系，往往主要以硒蛋白的形式发挥其作用。新春36号黑小麦中

5、硒含量的水平较高，且在第十三师已经推广，然而硒在其中是如何分布的？又是以什么方式存在的？目前鲜有报道。因此，本课题选用新疆新春36号黑小麦为原料，对其中硒的分布情况、碱溶性硒蛋白的提取工艺及分离纯化，以及体外抗氧化活性进行了研究，结果如下：1.对新春36号黑小麦中的各组分进行提取，结果得到硒含量分布情况为：硒蛋白中硒含量最高，硒多糖次之，硒核酸最少；硒在蛋白中的分布情况为：碱溶性蛋白>水溶性蛋白>醇溶性蛋白>盐溶性蛋白。通过对硒蛋白中氨基酸含量的测定可得到：其中含有多种氨基酸，但胱氨酸的含量却为0，可以推测可能是由于硒与硫具有共性

6、，从而取代了胱氨酸中的硫，生成硒代胱氨酸或者硒代半胱氨酸。2.经过响应面法对新春36号黑小麦中的碱溶性硒蛋白进行了提取研究，得到最佳提取条件为：0.17mol/LNaOH溶液、酸化pH4.7、66.0%的硫酸铵饱和度、料液比1∶10，此时碱溶性硒蛋白的提取率达到76.7%。3.采用纤维素CM-52离子交换柱分离纯化新春36号黑小麦碱溶性硒蛋白的最佳分离条件为：用pH为8.0的PBS缓冲液来溶解碱溶性硒蛋白粗提物作为样品，去离子水作为流动相，上样量为100mg，洗脱速度控制在1.0mL/min。分离纯化后的样品得到一个较为明显的峰，

7、经过SDS-PAGE电泳分析，得到分子量大约为55KDa单一蛋白。4.以Vc、BHT为对照，测定了样品对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除以及还原能力。结果显示，新春36号黑小麦碱溶性硒蛋白的体外抗氧化活性高于BHT，而低于Vc，其对DPPH自由基的清除率为62.87%，超氧阴离子自由基的清除率为68.86%，羟基自由基的清除率为50.47%，还原力的吸光值为0.787。关键词：硒；分布情况；碱溶性硒蛋白；制备；抗氧化活性IIAbstractSeleniumisoneofthenecessarytraceeleme

8、ntsofhumanbody,theintakeofSeandmanymetabolicisrelated,andhumanhealthanddiseasearecloselylinkedwithSe,thetraceelementselenium