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《《论文_胰酶制备新工艺的研究(定稿)》》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、胰酶制备新工艺的研究作者:吴晓英张聚宝林影梁惠仪李彦奇胰腺摘要目的研究从猪胰腺中提取胰酶的新工艺。方法使用9=7.5%异丙醇为提取溶剂,添加p=0.2%CaCI2和(p=1%胰酶粉为激活剂以及适量的保护剂,并加入NaHC03使体系的pH稳定在6.5-7.0之间,在室温下提取3h。结果在优化工艺条件下,制得的胰酶制品中的胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的酶活力分别达5200、57300、37000u/g以上,为中国药典所规定的最低酶活的8~10倍,收率10%〜12%。结论该工艺简单、提取效率高、产品酶活高
2、。关键词猪;胰腺;胰酶;胰蛋白酶;胰淀粉酶;胰脂肪酶PreparationofpancreatinfromswinepancreasWUXiaoying,ZHANGJubao,LINYing,LIANGHueiyi,LIYanqi(Dept,ofBioengineering,SouthChinaUniversityofTechnologyAndEngineering,Guangzhou510640,China)AbstractObjectiveTostudythenewprocessingtechn
3、iqueofpancreatinfromswinepancreas・MethodsUsed7.5%isopropylalcoholasextractingsolvents;added0.2%CaCI2+1%pancreatinasprotectingagents;regulatedpH6・5~7.0withNaHCO3;extractingtime3h.ResultsUnderoptimumconditions,pancreatinwithhighactivityandyieldwasobtaine
4、d.Theactivitiesoftrypsin,lipaseandamylopsinwereover5200u/g,57300u/gand37000u/grespectively,andtheyieldwas10%~12%.ConelusionItisasimpleandtimesavingtechniqueforthepreparationofpancreatinwithhighpurity,highactivityandhighyield.Keywordsswinepancreas;pancr
5、eatin;trypsin;steapsin;amylopsin胰酶是从猪、牛、羊等哺乳动物的胰腺屮提取得到的一种混合酶制剂,主要成分为胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶,还有竣肽酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶和核糖核酸酶等。胰酶系我国和国际上多国药典收载的助消化药品,用于治疗消化不良、食欲不振及肝脏疾患引起的消化障碍等。此外,由于胰酶中含有多种活性成分,可作为原料药从中提取所需生化物质。同时,工业胰酶广泛用于皮革加工,它优于其他微生物来源的蛋白酶,对皮革的软化、脱脂、松紧度起较好的调节作用。国内外
6、对胰酶的需求量较大。从猪胰腺屮提取胰酶的工艺已有不少报道[1~4],但活性和收率不尽满意,为更充分利用有限的胰腺资源,参照国内外的文献[5~7],比较了不同提取工艺的优缺点,对胰酶制备的多种条件如激活剂、提取溶剂、保护剂、激活时间和酸度等进行探索,建立一条利用稀异丙醇从猪胰腺中提取胰酶的新工艺。1材料与方法1.1实验材料猪胰腺、十二指肠、苦胆均由广州茅山肉联厂提供,在屠宰后1h内放入冰盒中保温,在3h内胰腺和十二指肠放入一20°C冰箱中冷冻,胆汁置细口瓶中在4°C冰箱中保存。1.2试剂酪蛋白,供胰酶
7、测定专用,中国药品生物制品检定所提供;马铃薯淀粉,牛.化试剂;其他试剂均为分析纯。1.3仪器756MC紫外可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;LD5-2A医用离心机,北京医用离心机厂;PHS-3C型pH计,上海精密科学仪器有限公司雷磁仪表厂;WX-2型真空泵,临海市精工真空设备厂;ZK82B真空干燥箱,上海实验仪器厂。1.4测定方法胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的酶活力测泄和炽灼残渣、干燥失重均按中国药典[8]方法进行。1.5基本工艺冻胰,绞碎适量稀异丙醇保护剂、激活剂调pH25°C下搅拌激活胰
8、浆<p=30%〜35%异丙醇过滤提取液(p=55%~65%异丙醇沉淀物丙酮真空干燥胰酶成品2结果与讨论2.1激活剂种类和用量的影响一般的胰酶制备工艺中,蛋白酶的激活,多采用自溶与加激活剂相结合的方法,激活剂包括Ca2+、胰酶粉、胆汁、十二指肠等,一般采用两种以上的激活剂,其中钙离子是必不可少的,因为胰蛋白酶原活化后进一步反应生成无活性的蛋口,加入0.02mol/LCa2+可以加速酶原活化而抑制副反应的发牛,提高收率,同时Ca2+又能激活脂肪酶。缺点是Ca2+亦是引起胰