胰弹性蛋白酶的制备ppt课件.ppt

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1、生物制药工艺学实验生物技术实验实验要求实验2人一组,穿工作服。实验听从老师安排,注意仪器使用,安全。不得缺席,旷课三次没有成绩。实验结束洗涤,值日、检查安全。实验报告:英文书写内容:实验目的(英文)实验原理(英文)操作流程(英文)实验结果(英文)讨论(英文、中文或双语)实验成绩评分标准平时实验20+实验报告60+设计实验20Experiment1:PreparationofElasticProteasefrompancreasandAnalysisofEnzymeActivity实验一:胰弹性蛋

2、白酶的制备与活性分析Purpose1.LearntheprincipleofPreparationofElasticProteasefrompancreas.2.Mastertheanalysismethodofenzymeactivity.Frozenpancreas(75g)Activation24℃,24hremovethefat,cutintopiecesadd50mlHAc-buff,mashedPancreaticplasmaadd250mlHAc-buff,ph4.525℃stir

3、for1hours,FilterFiltrate40gResinAdsorption25℃stirfor1.5hours,WaterwashingResin(absorbprotein)add50ml1MNH4Cl-buff,ph9.0stirfor1h,adjustpH(5.2

4、esEtherwashonetime,VacuumdryingElastasepowderProceduresstandardcurve2:SamplepreparationTake3tubestooperateaccordingtothetablebelow:制备工艺:附:树脂处理:取干AmoerliteCG50树脂,水漂洗后加5倍体积1NNaOH搅2小时,水洗至中性。加5倍体积1NHCl处理2小时,水洗至中性,再用pH4.50.1M醋酸缓冲液平衡过夜。注意事项离心的转子和离心机配套使用。离心

5、前要平衡转子。离心有机溶剂,要封上保鲜膜。干燥蛋白前要封上保鲜膜并戳洞。磁力搅拌器不要加热。

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