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时间:2019-09-30
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1、实验十四胶体制备和电泳1.摘要胶体11吨泳现象及其实验装置的研究相对来说起步较晚。有文献可查的实验装「置是1937年,A.Tselius设计的一套较粘密的界面移动法电泳装置⑴,主要川于蛋白质的研究,对于肉眼不能观察的界血移动,他采用条纹摄影技术跚宗,其工作为界面移动法奠立了基础,关于界而移动法的详细讨论,可参见LGLong^worth编辑的专著叫测量溶胶的了电位是通过测定在两钳电极间夕卜加一定直流电场(约100V左右),胶体溶液与辅助溶液间可见界而在单位时间内的移动距离。据公式泳动速/变二电极间距离_4兀r/u口—£°
2、辰电极间吐:(2.14.1)液体介电常数通过观察吋间r内电泳仪中溶胶与辅助液的界而在电场作用卜•移动距离即泳动速度”求G实验进行时,两电极上有气泡析出(发生电解),会导致辅助溶液电导率发生变化和扰动界面,影响实验结杲。可以将辅助溶液与1极川盐桥隔开或将钳电极改川电化学-上的可逆电极叭。关键词:电泳2.装置动电电位Fe(0H)3溶胶半透膜3・预习提问70°C蒸锚水图214.2半透膜热渗析(1)什么叫胶体的电泳现彖?与电渗有何异同处?(2)溶胶盍电电位是什么含义?能否真接测得?有哪些方法可测?(3)胶体聚沉有哪些条件?(4
3、)电泳公式各量含义及其单位?电泳仪能否测反离子移动速度?(5)影响胶体电泳测定的因素有哪些?4.操作(1)将实验数据填入下表室温大气压£=fj=E=/=G妒Gmf时间t/s界而高度hAn界而移动r/m电泳速率“/(m・L)平険U(m-S,)①按公式计算电们梯度及电泳速度O②由液体的介电常数(0~45。0:13^=4.4742687.54420x109,粘度等计算$电位。⑵文献值:绘氧化铁溶胶Q+O.O44V,胶体制备"L■UU半酬渗析取220mL蒸佛水加热至沸,滴加5%浓度FeCh纟20mL制戍0.5%Fc(OHh胶体
4、。络合或渗析反肉豚素络介律棉胶在300mL锥形瓶中制作半透膜,70°C〒
5、进行热渗析。至胶体电Y在15〜130pS间。或者趙冷却后加4%丿尿索络合多余的反离子C1。一辅助液;恤备用KC1配制与胶体扩散泾・相仿、电导也相似的辅助液。电泳仪装克通电测竝N数据处理娄公式并注意单位换算计铤动电电位。取测量平均石二I通电半小时,每5分钟记录1次胶体向负极的泳动距氏二]Y二钳片弯成半板成为'I彳T电极,测試二极跆离,小心灌胶体及辅助液务使界I丽j晰。电的乂向冉测?硫化业伸溶胶$-O.O32V,学生测值误差要求:±0.005V6.点
6、评(1)实验关键①用2~5%FcCl?溶液水解制备FcCOHk溶胶时,FcCb溶液应逐滴加入至U沸腾的蒸馆冰中并不断搅拌,加完后根据情况可适当延长煮沸时间,制得的溶胶不能长时间存放,若底部有沉淀物应除去。用火棉胶制作半透膜,渗析1~2天,其间需经常换蒸绸水。热渗析可加快渗析过程。还对配合加嫌素,缩短渗析时间。不过,渗析也立适当,渗析过分,没有足够量的反离子保障胶体的电学稳定性,溶胶反而易聚沉。②电泳仪应洗净,避免因杂质混入电解质溶液而彩响溶胶的了电位,甚至使溶胶凝聚。③辅助液的选择和配制对结果的准确性也冇较人影响。如辅
7、助液(本实验为稀NaCl溶液)的电导率与溶胶的电导不一致,电泳时溶胶部分为辅助液部分的电位梯度就不同,<电位的计算公式就不能适用。理论分析和经验均表明:若辅助液与溶胶电导不同,在界面处的电场强度发生突变,实验时就产生界而在一管中I二升的距离不等于在另-管中卜降的距离的现象如辅助液电导过人,会使界而处溶胶发生聚沉。有报道叫用NaCI稀溶液配制的辅助液远比川HC1的好。①实验过程屮,施于二极的电压的稳定性必须随时检查,予以保证。(2)界而移动法的困难之一是与溶胶形成界而的辅助溶液的选择。溶胶的$电位对介质成分十分敏感,从止
8、负离子迁移速率要求和近來说,KC1比KNO3好,总是想到还是原配溶液好,可以想象用超离心方法取出中溶胶中分离出来的分散介质作为辅助液,称为“超滤液”。(3)木实验中采用两钳电极施加外界电场,电压达到100V以匕两电极上有气泡析出(发生电解),致辅助液电导发生变化和扰动界仙影响实验。改善的办法是将辅助液与电极用盐桥隔开,或用电化学上的可逆电极替换钠电极叫(4)计算:电位时,“、g值采川同温度下纯水的数据,会引入一定误差。(5)在一般的物理化学教科书或实验教材中推导了电位与胶粒淌度的关系式。是在进行了一系列的简化的情况卜-
9、得到的,衣更详细的电泳运动理论中,还必须考虑许多因索[5"61171,例如:在外加电场中扩散层中的反离子向着与胶粒移动相反的方向运动。因此,胶体粒子是在运动着的液体屮泳动,其结果是使电泳速度变慢,称为延时(retardation)效丿应。另一需要考虑校正的是滞后效应。由于胶体质点与扩散层屮的反离子向相反方向运动,质点周1制原來对称
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