胰酶制备新工艺的研究

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1、胰酶制备新工艺的研究作者：吴晓英张聚宝林影梁惠仪李彦奇【关键词】 胰腺   摘 要 目的研究从猪胰腺中提取胰酶的新工艺。方法使用φ=7.5%异丙醇为提取溶剂，添加ρ=0.2%CaCl2和φ=1%胰酶粉为激活剂以及适量的保护剂，并加入NaHCO3使体系的pH稳定在6.5~7.0之间，在室温下提取3h。结果在优化工艺条件下，制得的胰酶制品中的胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的酶活力分别达5200、57300、37000u/g以上，为中国药典所规定的最低酶活的8~10倍，收率10%~12%。结论该工艺简单、提取效率高、产品酶活高。　

2、　关键词 猪；胰腺；胰酶；胰蛋白酶；胰淀粉酶；胰脂肪酶　　Preparationofpancreatinfromswinepancreas　　WUXiaoying,ZHANGJubao,LINYing,LIANGHueiyi,LIYanqi　　(Dept.ofBioengineering,SouthChinaUniversityofTechnologyAndEngineering,Guangzhou510640,China)　　Abstract  ObjectiveTostudythenewprocessingtechni

3、queofpancreatinfromswinepancreas.MethodsUsed7.5%isopropylalcoholasextractingsolvents;added0.2%CaCl2+1%pancreatinasprotectingagents;regulatedpH6.5~7.0withNaHCO3;extractingtime3h.ResultsUnderoptimumconditions,pancreatinwithhighactivityandyieldwasobtained.Theactiviti

4、esoftrypsin,lipaseandamylopsinwereover5200u/g,57300u/gand37000u/grespectively,andtheyieldwas10%~12%.ConclusionItisasimpleandtimesavingtechniqueforthepreparationofpancreatinwithhighpurity,highactivityandhighyield.　　Keywords swinepancreas;pancreatin;trypsin;steapsin

5、;amylopsin　　胰酶是从猪、牛、羊等哺乳动物的胰腺中提取得到的一种混合酶制剂，主要成分为胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶，还有羧肽酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶和核糖核酸酶等。胰酶系我国和国际上多国药典收载的助消化药品，用于治疗消化不良、食欲不振及肝脏疾患引起的消化障碍等。此外，由于胰酶中含有多种活性成分，可作为原料药从中提取所需生化物质。同时，工业胰酶广泛用于皮革加工，它优于其他微生物来源的蛋白酶，对皮革的软化、脱脂、松紧度起较好的调节作用。国内外对胰酶的需求量较大。　　从猪胰腺中提取胰酶的工艺已有不少报道［1

6、~4］，但活性和收率不尽满意，为更充分利用有限的胰腺资源，参照国内外的文献［5~7］，比较了不同提取工艺的优缺点，对胰酶制备的多种条件如激活剂、提取溶剂、保护剂、激活时间和酸度等进行探索，建立一条利用稀异丙醇从猪胰腺中提取胰酶的新工艺。　　1 材料与方法　　1.1 实验材料 　　猪胰腺、十二指肠、苦胆均由广州茅山肉联厂提供，在屠宰后1h内放入冰盒中保温，在3h内胰腺和十二指肠放入－20℃冰箱中冷冻，胆汁置细口瓶中在4℃冰箱中保存。　　1.2 试剂 　　酪蛋白，供胰酶测定专用，中国药品生物制品检定所提供；马铃薯淀粉，生化试剂

7、；其他试剂均为分析纯。　　1.3 仪器 　　756MC紫外可见分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；LD5-2A医用离心机，北京医用离心机厂；PHS-3C型pH计，上海精密科学仪器有限公司雷磁仪表厂；WX-2型真空泵，临海市精工真空设备厂；ZK82B真空干燥箱，上海实验仪器厂。　　1.4 测定方法 　　胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的酶活力测定和炽灼残渣、干燥失重均按中国药典［8］方法进行。　　1.5 基本工艺　　冻胰，绞碎适量稀异丙醇    保护剂、激活剂 调pH    25℃下搅拌激活胰浆φ=30%~35%异丙醇    

8、    过滤      提取液φ=55%~65%异丙醇 沉淀物丙酮    真空干燥胰酶成品　　2 结果与讨论　　2.1 激活剂种类和用量的影响　　一般的胰酶制备工艺中，蛋白酶的激活，多采用自溶与加激活剂相结合的方法，激活剂包括Ca2+、胰酶粉、胆汁、十二指肠等，一般采用两种以上的激活剂，其中钙离子是必不