海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响

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1、万方数据Chin_，MarDrugs，2005-，“聊。V01．24No．3中国海洋药物杂志2005年6月第24卷第3期海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响齐战”，王勇杰1。王善政1，何奇1，邵军2，吕丽红2，尹金岭2(1．山东大学齐鲁医院胸外科，山东济南250012；2．山东大学医学院手术学研究室，山东济南250012)摘要：目的探讨海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响。方法新鲜配制两组保存波，其中：I组LPD+DMS0，Ⅱ组LPD+DMS0+海藻糖(O．10rn01．L_1)。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述两

2、种溶液的冻存管，在程序降温仪降至一80℃后投入波氮中保存，分别在1，15。30，60，120d后对气管组织体外培养，并加入3H—TdR做标记，检测细胞掺入率。结果采用3H-TdR体外组织培养，低温保存后I组气管3H—TdR掺入率(88．72％～78．21％)明显高于Ⅱ组(80．99％～70．75％)，这种趋势可长时间持续(共120d)。结论含有海藻糖的LPD溶液在低温下对气管组织细胞有明显的保护作用；3H-TdR体外组织培养的方法可以比较客观地反映了器官保存后的活力。．关键词：海藻糖；气管低温保存；气管组织细胞活力；3H—Td

3、R中图分类号：R931．711，R96文献标识码：A文章编号：1002．3461(2005)03-0022．04EffectsoftrehaloseontrachealtissueandcellviabilitiesaftercryopreserVationQIZhanl，WANGYong—jiel，WANGShan-zhen91，HEQil，SHAOJun2，LULi—hon92，YINJin-lin92(1．DepartmentofThoracicSurgery，QiluHospital，ShandongUniversit

4、y，Jinan250012，China；2．DepartmentofOperationResearch，MedicalCollege，ShandongUniversity，Jinan250012，Chi—na)Abstract：ObjectiveTodetecttheeffectsoftrehaloseontrachealtissueandcellviabilitiesaf-tercryopreservation．MethodsInbredmaleSprague-Dawley(SD)ratsweresacrificedwith

5、intraperitonealinjectionofketamine(150mg·kg一1)．Thetracheaswereremovedandim—mersedimmediatelyinthefreezingmediumoflOWpotassiumdextran(LPD)solutioncontai—ningwithlO％dimethylsulfoxide(DMSO)(GroupI)andcontainingwith10％DMSOandO．10molL．1trehalose(Group1I)respectively．Aste

6、rileplastictubecontaininga卜em—longtracheawasfilledwiththefreezingmedium，sealed，andfrozento一80℃atrateof一1℃perminuteinaprogrammablefreezer．Thenthetubewasstoredinliquidnitrogen(一196℃)fordifferentperiodsofpreservation(1，15，30，60，120d，n一---5)．Forviabilityassessment，thesp

7、ecimenwasthawedat37℃inanincubatorandrinsedwithphysiologicsalinesolution10times．Next，eachspecimenwastrimmedforequalweight(100mg)andincubatedin3mLofRPMll640mediumcontaining10％fetalbovineserumat37℃for24hours．Thenthetra-cheaswerelabeledwith39Ci3H—TdRfor16hours．Thespecim

8、enswerehydrolyzedin80％formicacid(0．1mL)andincubatedati00℃for2hours．Atlast，thesolutionwascountedbyliquidscintillationcounter．ResultsTheaver