辣木多糖的结构鉴定、抗氧化活性及其对小鼠巨噬细胞免疫活性的影响

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1、学校代码：10564学号：2016307408分类号：S816.79硕士生毕业论文辣木多糖的结构鉴定、抗氧化活性及其对小鼠巨噬细胞免疫活性的影响代童童第一指导教师：孙宝丽副教授第二指导教师：廖文镇副教授学院名称：动物科学学院专业学位类别：农业推广硕士领域：养殖答辩委员会主席：刘德武教授中国·广州2018年6月华南农业大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完

2、全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：日期：学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华南农业大学。学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅或在校园网上发布并供校内师生和与学校有共享协议的单位浏览（除在保密期内的涉密论文外）；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。作者签名：日期：导师签名：日期：学位论文提交同意书本学位论文符合国家和华南农业大学关于

3、研究生学位论文的相关规定，达到学位授予要求，同意提交。导师签名：日期：学科带头人签名：日期：摘要本实验以辣木叶粉为材料，对辣木多糖的分离纯化、结构鉴定、抗氧化活性和免疫活性进行了探究。实验选择红外光谱、刚果红实验、紫外光谱、扫描电镜和原子力显微镜对辣木多糖的结构进行鉴定；然后，选择DPPH法、ABTS法和ORAC法对辣木多糖的抗氧化活性进行了研究，探究了温度和酸碱性对该物质抗氧化活性的影响；同时，选择小鼠巨噬细胞RAW264.7作为实验对象，探究了辣木多糖对巨噬细胞免疫活性的影响。旨在研究辣木多糖作为一种新型添加剂的生物学功能，以及为建立细胞抗氧化体系和动物免疫活性评价体系

4、提供参考依据。结果表明：（1）本实验采用水提法从辣木叶粉中提取到水溶性多糖，经DEAE-Sephrose阴离子交换层析柱纯化后得到辣木多糖纯品。（2）辣木多糖的化学结构分析表明辣木多糖的分子量为104031Da，结合红外光谱分析和原子力显微镜观察发现该多糖具有β-吡喃葡聚糖和甘露糖以及糖链结构。此外，通过热重分析发现辣木多糖具有良好的热稳定性。（3）通过DPPH法、ABTS法和ORAC法检测了辣木多糖的自由基清除能力，发现辣木多糖在高温、强酸、强碱环境下仍然具有生物活性，证明该物质具有良好的抗氧化活性。（4）本实验研究了辣木多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖活性和免疫活性的

5、影响，发现辣木多糖能够显著促进巨噬细胞的增殖活性，表明该多糖无细胞毒性。此外，辣木多糖对巨噬细胞分泌NO、IL-1α、IL-6、IL-12和TNF-α等细胞因子均具有促进作用，表明该多糖具有良好的免疫活性。本研究表明，辣木多糖是一种良好的抗氧化剂和免疫调节剂，可以作为一种新型饲料添加剂应用到实验中。同时，辣木多糖的体外抗氧化活性和体外免疫活性研究取得了显著效果，也为细胞抗氧化体系的建立和动物活体实验提供参考依据。关键词：辣木多糖；分离纯化；结构鉴定；抗氧化活性；巨噬细胞；免疫活性IStructureidentification,antioxidantactivityandM

6、acrophageimmunomodulatoryactivityofpolysaccharidesisolatedfromMoringaOleiferaDaiTongtong(Collegeofanimalscience,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China)Abstract:Inthisexperiment,weisolatedMoringaoleiferapolysaccharidesfromMoringaoleiferaleavestostudiedthewayofisolation,purif

7、ication,structureidentification,antioxidantactivityandimmuneactivityofthepolysaccharides.Firstly,IRspectroscopy,Congoredtest,UVscanning,SEMelectronmicroscopy,andAFMmicroscopywereusedtoidentifythestructureofMoringaoleiferapolysaccharides;Next,DPPHmethod,ABTSmet