平菇多糖提取、鉴定及其抗氧化活性的研究

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1、中文摘要平菇是一种常见的食用菌，在我国种植广泛。平菇富含营养物质，其主要的生理活性成分是平菇多糖。近年来，平菇多糖因具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种生物学活性而备受关注。本论文以平菇子实体为研究原料，建立了平菇多糖的提取优化条件以提高多糖得率；对提取的平菇多糖进行分离纯化，并对其结构进行鉴定：对平菇多糖体外清除DPPH、超氧阴离子和羟基自由基的能力和对高糖环境下的肾系膜细胞的作用进行研究。试验结果如下：1．正交试验优化提取条件：以平菇予实体为研究对象，进行单因素影响试验，筛选出主要影响因素；再结合实际综合考虑，以正交试

2、验确定最佳提取工艺，具体为：以1：30的料液比，提取温度为60℃，提取时间为3小时，乙醇的最终浓度为75％。根据上述优化的工艺对平菇多糖进行提取，多糖的得率为5．7％。2．粗多糖PSPO，经DEAE．52阴离子交换层析，得到水洗多糖组份PSPO．1和PSPO．2，盐洗多糖组份PSPO．3和PSPO．4(0．1．0mol／L的NaCl溶液梯度洗脱)；PSPO一1和PSPO．4经AKATASuperdex．75凝胶柱层析柱进一步分离纯化，得到PSPO—la和PSPO-4a两种均一性多糖。3．PSPO．1a和PSPO一4a

3、经红外光谱、紫外光谱、HPLC检测，PSPO．1a分子量为1．8x104Da，单糖组成为Man，Glu，Gal，Xyl和Rha(摩尔比为2．47：0．91：1．O：1．66：3．87)；PSPO．4a分子量为1．1x106Da，单糖组成为Rha，Man和Gal(摩尔比为0．92：2．69：1．O)。4．体外抗氧化实验结果：PSPO．1a和PSPO．4a对DPPH的清除率IC50分别为1．434-0．055mg／mL和2．34-0．067mg／mL；对超氧阴离子的清除率ICso分别为2．0士0．066mg／mL和4．8

4、4-0．067mg／mL；对羟基自由基的清除率ICso分别为6．14-0．242mg／mL和7．0士0．282mg／mL，PSPO—la的抗氧化活性高于PSPO-4a。5．对高糖环境下的肾系膜细胞结果：PSPO．1a和PSPO．4a均能抑制高糖环境下肾系膜细胞的增殖，低浓度平菇多糖能提高高糖环境下肾系膜细胞上清液中SOD和GSH．Px酶的活性，减少MDA生成，说明多糖具有保护细胞对抗高糖环境刺激产生的氧化压力。同时，平菇多糖能降低系膜细胞TGF．131、FN和Ⅳ型胶原的合成，提示平菇多糖可抑制肾系膜增生肥大，减少胞外

5、基质蛋白的积聚，对预防和治疗糖尿病肾病的发生发展应有很好的作用，具有潜在应用价值。关键词：平菇多糖；多糖结构；抗氧化；肾系膜细胞；胞外基质蛋白；TGF-131IIAbstractPleurotusostreatusiswellknownasanediblefunguswhichhashi曲lynutritiousfunction，andareplantedwidelyinChina．Postreatusarerichinnutrients，polysaccharidesofP．ostreatusaremainfunc

6、tioncomponents．Inrecentyears，thepolysaccharidesfromP．ostreatuswerepaidmuchmorecloseattentionsduetomanykindsofbiologicalactivitiessuchasantioxidant，anti—inflammatory,antitumor，anti—promotionpropertiesandSOon．Inthisthesis，thematerialswerethefruitingbodiesofP．1eur

7、otus．OrthogonaldesignmethodwassetuptofindoptimizationoftheextractingconditionsforpolysaccharidesfromP．ostreatus，whichcouldimprovetherateofpolysaccharide．Thenpolysaccharidesextractedfi-omtheP．ostreatuswereisolatedandpurified，inaddition，thestructuralcharacteristi

8、csofthepurifiedpolysaccharidesweredetectedandexplained．Finally,theactivitiesofpolysaccharidesfromP．ostreatusonrepairingthedamageofmesangialcellsinducedbyhi曲glucoseandscaveng