野葛根多糖的提取、分离纯化、结构鉴定及对小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫调节活性研究

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1、工程硕士学位论文野葛根多糖的提取、分离纯化、结构鉴定及对小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫调节活性研究作者姓名董洲工程领域食品工程校内指导教师吴晖教授校外指导教师李小林高级工程师所在学院食品科学与工程学院论文提交日期2018年6月Extraction,Isolation,Purification,StructuralcharacterizationandImmunomodulatoryActivityinRAW264.7cellsofthePolysaccharidesfromPuerarialobate(willd.)OhwirootADissertationSub

2、mittedfortheDegreeofMasterCandidate:ZhouDongSupervisor:HuiWuSouthChinaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分类号：TS201.3学校代号：10561学号：201521021516华南理工大学硕士学位论文野葛根多糖的提取、分离纯化、结构鉴定及对小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫调节活性研究作者姓名：董洲指导教师姓名、职称：吴晖教授申请学位级别：专业型硕士学科专业名称：食品工程论文形式：ꇶ产品研发ꇶ工程设计ꇶ应用研究ꇶ工程/项目管理ꇶ调研报告研究方向：天然产物活性研

3、究论文提交日期：2018年4月20日论文答辩日期：2018年6月6日学位授予单位：华南理工大学学位授予日期：年月日答辩委员会成员：主席：张友胜委员：吴晖、余以刚、肖性龙、刘冬梅华南理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研宄所取得的研宄成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体。，均已在文中以明确方式标明本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。：作者签名：曰期＞次年＜月幺曰学位论文版权使用授权书、：

4、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，即研宄生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华南理工大学。学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅（除在保密期内的保密论文外学校可以公布学位论文的全、部或部分内容，可以允许采用影印缩印或其它复制手段保存、汇编学位一论文。。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相致本学位论文属于：□保密：月日），（校保密委员会审定为涉密学位时间年＾＿＿＿于年月日解密后适用本授权书。＿＿＿／￥保密同意在校园网上发布，ｇ，供校内师生和与学校有共享协议的单位

5、浏览；同意将本人学位论文提交中国学术期刊（光盘版）电子杂志社全文出版和编入ＣＮＫＩ《中国知识资源总库》，传播学位论文的全部或部分内容。上“”（请在以相应方框内打Ｖ）者签：Ｊ作导名：日期ｙＫ指教师签名：曰期作者联系电话：电子邮箱：联—系地址（含邮编）：摘要野葛根为豆科植物野葛藤PuerariaLobata(willd.)Ohwi的干燥根。本文以野葛根为原料，从中分离纯化出两种水溶性活性多糖GE-1及GE-2，并分别从结构，免疫调节活性方面对其进行比较。结果表明：采用乙醇回流法除去野葛根中黄酮类物质，采用酶解法除去野葛根中的淀粉及纤维素

6、，采用Sevag法除去蛋白质，采用“水提醇沉法”获得野葛根中水溶性粗多糖，经阴离子交换柱层析DEAE-SepharoseFastFlow和葡聚糖凝胶柱层析SephacrylS-200HR分离纯化后得到GE-1和GE-2两个组分。其中GE-1为中性多糖；GE-2为酸性多糖，糖醛酸含量为1.5%。经测定，野葛根多糖GE-1的分子量为9.9kDa，GE-2分子量为12.3kDa；扫描电子显微镜显示，GE-1为网状结构，表面有细微的孔；GE-2为表面光滑无凸起的条带状结构。紫外全波段扫描显示GE-1及GE-2均不含蛋白质及核酸类物质，不属于糖蛋白。红外光谱扫描显示，GE-1及

7、GE-2均含有多糖特征吸收峰，且只含有α型吡喃糖，不含α型呋喃糖。单糖组成分析表明GE-1及GE-2均由葡萄糖组成，不含其它种类单糖。高碘酸氧化，Smith降解及甲基化结果表明GE-1含有1,4-Glcp和1,6-Glcp糖苷键，两者之间的摩尔比为1.72:2.64。GE-2中含有1,3-Glcp，1,4-Glcp，1,3,6-Glcp及1,6-Glcp四种糖苷键，各糖苷键之间的摩尔比为1.90:5.52:1.43:2.45。一维核磁共振分析显示，GE-1是由→4)-α-D-Glc(1→和→6)-α-D-Glc(1→糖残基组成的直链结构；GE-2含有