茯苓多糖对雏鸡细胞免疫活性的影响及其抗肿瘤作用

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1、’&GH@I>A>JKLMINOKP+>Q>M@INMR5S@>IS>NIT<>SHIKOKBR$+KO#%/$6K#!!$"&&/茯苓多糖对雏鸡细胞免疫活性的影响及其抗肿瘤作用!!!"余建国，姜正前，严晗光，朱楼英（!#金华职业技术学院生物工程学院，浙江金华$%"!&&’；"#金华市药品检验所实验动物中心，浙江金华$%"!&&’）$$摘要：给!日龄((雏鸡经腹腔注射马立克氏病病毒（)*+）强毒株（&#",-.只），并从当日开始给试验组雏鸡以%个剂量连续肌肉注射茯苓多糖!周，分别于’、!/、"0、/"、12日龄取脾组织，制备脾细胞悬液，用3-45(法检测了雏

2、鸡淋巴细胞转化率、67细胞活性及)!活性，并与对照组比较。结果表明，%个剂量均可显著提高雏鸡的淋巴细胞转化率、67细胞活性及)!活性，且中剂量组效果优于其他"个剂量组。证实茯苓多糖能提高)*+强毒株感染雏鸡的细胞免疫活性，并具有抗肿瘤作用。关键词：茯苓多糖；细胞免疫活性；淋巴细胞转化率；抗肿瘤中图分类号：501%#’$文献标识码：($文章编号：!&&&82/!9（"&&/）!!8&&’&8&/$$茯苓（!"#$%&"&"’）为多孔菌科真菌茯苓的干燥马立克氏病（)*）是鸡的一种传染性肿瘤疾［!］菌核，中医学认为，茯苓补气益元，祛邪扶正。现病，以外周神经、性腺、

3、各内脏器官、虹膜、肌肉和皮代医学研究证实，茯苓可调节机体的免疫功能，羧甲肤发生不同程度的单核细胞浸润和肿大为特征。自基茯苓多糖能使小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率增加!929年以来，许多国家研究生产了用于防制)*的1&:以上，并使小鼠胸腺、脾、淋巴结质量明显增多种疫苗，在防制该病中发挥了一定作用，但)*在［"］加。诸多试验表明，茯苓多糖在体内体外均能增各国的发生仍较为普遍。强细胞免疫反应，体外试验可使淋巴细胞活性增强)*的病原马立克氏病病毒（)*+）是一种细胞［%］结合性疱疹病毒，从世界目前分离到的)*+毒株"&;"0倍，并对脾<细胞生长因子有增强作用。另外，茯苓多

4、糖有明显的抗肿瘤作用，能抑制小鼠看，不同毒株的毒力差异极大。"&世纪0&年代以5!0&实体瘤生长，抑制人白血病细胞=-82&增殖，来，各国相继分离到)*+超强毒株（DD)*+），并且对->?@A肺瘤细胞转移也有抑制作用，对生长迟缓认为DD)*+是造成=+<疫苗免疫失败的重要原的移植性肿瘤作用尤为显著［/］。茯苓抗肿瘤作用因。由于目前应用的)*疫苗不能完全保护鸡免受的机理一方面是直接细胞毒作用；另一方面是通过DD)*+的侵袭，因而应用免疫调节剂增强鸡的非特增强机体免疫功能激活免疫监视系统抑制肿瘤生异性抵抗力成为提高疫苗免疫效果的重要途径。黄长。茯苓多糖除直接抑

5、制肿瘤细胞外，还具有免疫芪多糖口服制剂（(E5）用于4F*、)*防制的研究已［2，’］增强作用。茯苓多糖的免疫增强作用是通过细胞免有诸多报道。淋巴细胞和)!、67细胞在免疫细胞占有重要疫和体液免疫"种途径来实现的，在体液免疫中，茯作用，具有特殊的抗原物质与非自身成分相互作用苓多糖能使免疫球蛋白4BC含量上升；在细胞免疫的能力，可通过多种途径发挥强大的免疫杀伤和清方面，茯苓多糖主要是通过激活)!，增强吞噬细胞除作用，协同杀伤外来异物和肿瘤细胞。本研究旨的吞噬功能，刺激<细胞的转化，并诱导白介素（4-8在以免疫功能尚未发育完善的新生雏鸡为动物模［1］!、4-8"

6、）等细胞因子的生成。型，以淋巴细胞转化率和)!细胞活性、67活性为检测机体免疫状态的指标，研究茯苓多糖对鸡免疫收稿日期："&&/8&28&0功能的影响和抗肿瘤作用。作者简介：余建国（!9’/），男，浙江省龙游县人，讲万方数据师，硕士生。中国兽医科技EE第’%卷EE第""期EE$&&%年A"颗粒完全溶解后，在酶标仪波长2H2K.处（下同）!"材料与方法测!值，据下列公式计算淋巴细胞转化率：!!!"试验动物淋巴细胞转化率LM（试验孔!2H2K.6对照孔试验鸡为"日龄##鸡，共$%&只，购自浙江省!2H2K.）0对照孔!2H2K.金华市’年内未发生过()的某鸡场。

7、"!,!’E;N细胞杀伤活性测定E按上述方法采取!!#"病毒株,样本，制备脾细胞悬液，调细胞浓度为2G"&0./，试验用()*强毒株（+()*）由南京农业大学取连续传代的靶细胞C#>D"（活性OH2L），调浓度传染病学教研组惠赠。2!!$"茯苓多糖至$!2G"&0./。试验用茯苓多糖由金华市药品检验所提供。在H,孔酶标板P孔加效应细胞"&&%/，34(5!!%"试验动物分组和处理",%&"&&%/；B孔加靶细胞"&&%/，34(5",%&"&&将试验鸡分为%组，每组,&只。第!-"组为%/，PQB孔加效应细胞"&%/，靶细胞"&&%/。各试验组，第#组为对照

8、组。各组鸡在"日龄腹腔注设’个复孔，置’A7二氧化碳