水牛腔前卵泡分离培养的初步研究

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1、广西大学硕士学位论文水牛腔前卵泡分离培养的初步研究姓名：冯贵雪申请学位级别：硕士专业：动物遗传育种与繁殖指导教师：石德顺2003.5.1!查黧查：查竺些熬照竺竺苎苎篓黧翌苎竺墨水牛腔蓠爹器泡分离培养的初步研究摘要本聚究瓣零譬势泡在翔巢审的分布规律及缝织学特锰、永牛腔蓠麴泡的分离与培养方法进行了系统研究。(1)用常规石蜡切片法研究水牛卵泡在卵巢中的分布规律与结构特缝。{结果表弱，各级翱沲的分雍舆蠢明显的区域性：原始麴泡位予翱巢皮质的最外瑶，形成原始卵沲层，初级卵泡位于皮质的中层，次级爹算泡位于富含m管的皮质最内层；原始卵泡、初级卵泡和次缎卵泡的赢径分别为36．9士7

2、．7，48。7±8。9和91．9士27。3pLm；警之对应卵母细胞的童径分潮为19．6走6．0，27．3+--7．1，49．1盘17。4陲m；原始卵泡和襁级卵淹酌鬏粒细胞数为10．8-I-2．3个和18．1+-3．1个。、#<2)对水牛腔前翱泡的分离方法进行了系统摸索。f结果发现，梳刮法(醚1)胃获每个承警卵巢分离褥到腔蓠郛泡152．4±‘

3、霹。8校、鬣萋多于剪碎法(M2，32．6+-14．8)和盟微分离法(M3，9．0±3．4)。进一步试验发现，MI所用工具的针距以500—750弘m较为合适。电镜分析缕果表鞠，M1法苓损伤麴泡的基膜。舞l该法分蔫黄牛腔蓠翔沲，每

4、个麴鬃可褥到腔前卵泡1195．2±685．0枚。由此表明，M1能有效分离水牛和黄牛的腔前卵泡。t《3)探讨7维生素C、FSH耱EGF对承簪腔黄靼泡发弯的影晌。结果发现，维生素C能维持后期卵泡的形态，对卵泡增长及存活没有彩响，FSH能促进卵泡的体外增长，但对卵泡形态及存活没有影响，当筠维生素C接露镶用跨，援黪泡增长的撵翔堪强；EGF襞键遴培养耪期承警腔前卵泡的增长，且与FSH有协丽作用。(4)探讨了不同大小水牛腔前卵泡(60—180pLm)的体外培养效果。发魏随着鞭泡的直经增加，体终荐活率升蔫，增长的幅魔上升，爨常率下降。(5)比较了普通培养法、二维培养法(琼脂糖铺

5、底)和兰维培养法(琼脂糖包埋)的水牛腔藏卵泡培养效果。{结暴发凌，三维培养法逶寇培养60—100}Im的卵泡，两=维法有利于100—140pm卵沲的体外发育。。j关键谰：水牛：胺前卵泡；分离；培旁‰组织学竺生篓查!查竺些愁罂苎竺苎兰氅竺翌兰兰墨一。一．——APREH矗耋王NARYS夏UDYoN噩薹嚣lSo酞T薹ON轰NDCUUIIUREOFBUFFALOPREANTRALFOLLICLESABSTRACT髓epresentstudieswereconductedtoinvestigate疆edistributingandthehistologicalcharact

6、erofbuffalopreantralfolliclesinovary，andexploreamethodforisolationandcultureofbuffalopreantralfollicles．f1)誓熟edistribuLingandhistologicalcharacterofbuffalopreantralfoIliclesinovarywasstudiedbymeansofparaffinsection．Thedistributingofdifferentstagefollicleshaddistinctlyregion．Primordial

7、follicles，whichhadonelayerofsquamousgranuiosacells．werealwayslocatedintheouterpartofthecortex；Primaryfollicles，whichhadasin露elayerofcubicalgranulosacell，werefoundinthemiddlecortex．Secondaryfollicles，whichdistributedmanylargebloodvessels。hadtwoormorelayersofcubicalgranulosacellsandwere

8、distributedonlywithintheinnerregionofthecortex．Fotlicteshadtwoor4layersofgranulosacells．whichdistributedasymmetricly．Thediameterofprimordial．primaryandsecondaryfollicleswas36．9±7．7．48．7±8．9and92．O±2713Ⅲnrespectivelyandthediameterofcorresponding00cyteswas19．6±6，O。27．3±7，1and49．1±17。4tx

9、mresp