人苍白杆菌的耐药表型、基因型和分子流行病学的研究

《人苍白杆菌的耐药表型、基因型和分子流行病学的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＂■？？■．．分类号Ｒ４４６．５学校代号１０５７７ＵＤＣ６１０密级学号２０１１０１０４８户抑（中虔為乂＃Ｇｕａ打ｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ硕ｄ：学位论文（兴同等学力申请硕±学位）人苍白杆菌的耐药表型、基因型和分子流巧病学的研究学位申请人龙一飞指导教师姓名专业名称中西医结合基細申请学位类型科学学位论文握交日期２０１５年１１月广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得

2、的成果。除文中已经特别加Ｗ注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名曰期：年月曰立咬／关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅巧借阅。本人授权广州中医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵

3、守此规定）论义化者豁名论文导师签名／曰期；＞＾年／之月円／摘要研究背景和目的：ｃｈｒｏｂａｃｔｒｕｍａｎ一人苍白巧菌（Ｏｔｈｒｏｐｉ）属于苍白杆菌属，是种非发酵型的革兰一阴性需氧巧菌。上世纪８０年代Ｗ前人们普遍直认为其不具临床意义，无致病性。但Ｗ自１９８０年Ａｐｐｅ化ａｕｍ等报道第１例人苍白巧菌引起膜腺胳肿病例Ｗ来，人感染苍白杆，逐渐引起了人们重视。目前菌的报道越益増多，绝大多数研究者己认为，人苍白杆茜是一类条件病原菌，其感染往往与患者局部或全身免疫功能低下有关，如移植器官，肿瘤晚期或使用免疫抑制剂、过度劳累等，可引起败血症、脑膜炎、腹膜炎等疾病

4、但近年国内外也不断有报道人苍白杆菌可造成免疫功能正常人群发病，因此该菌己被一Ｖａ－认为是种人类致病菌。ｉｄｙａ等通过Ｍｅｄｌｉｎｅ检索了１９８９２００５年与人苍白杆菌相关的１２２篇医学文献中４１篇是人苍白杆菌感染的临床个案报道，其中１５篇是免疫功能正Ｗ常人感染该菌的文献。我国目前开展类似于１化基因测序的单位为数不多，现临床上多数采用Ｖｉｔｅｋ２、ＡＰ一Ｉ鉴定二者的对，细菌，但苍白杆菌属的鉴定只有人苍白杆菌这唯的结果会错误地将苍白杆菌属的其他种鉴定为人苍白杆菌（比如中间苍白杆菌、解糖精假苍白杆菌等），同时也有可能将其他生化反应与之类似的菌错误的鉴定为人苍白杆菌

5、（如玫瑰Ｐ一单胞菌属１），所Ｗ大部分医院对于苍白杆菌属的鉴定通常只有人苍白杆菌个种，该鉴定方法存在一定局限性。关于人苍白杆菌耐药性及其耐药机制的研巧，国内外少见有报道且研究内容也十分笼统。目前对于人苍白杆菌耐药性的报道主要为对于亚胺一培南、氨基糖昔类、哇诺丽类药物敏感，对、二、Ｈ代头抱、青霉素类耐药，对于８一，９头抱化朽的耐药率存在定的差别ｔＬ但这些研究报道所纳入的实验茜株鉴定仅仅依３］ｔｅｋ２［靠Ｖｉ、Ａ門方法，而根据蔡婷婷同学的前期实验内容，我们发现其实人苍白杆菌、中间苍白杆菌、解糖精假苍白杆菌之间的耐药特点迴然不同。因此针对人苍白杆菌的耐药情况，本实验

6、对１７株经１６ＳｒＲＮＡ基因测序鉴定为人苍白杆菌临床分离株进行耐药表型、基因型和分子流行病学的研巧，（１）采用Ｖｉｔｅｋ２Ｃｏｍｐａｃｔ革兰阴性菌ＡＳＴ－ＧＮ３１药敏鉴定微量肉汤法及聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测人苍白杆菌的耐药表型和常见耐药基因型，从不同层面上发现人苍白杆茜的多重耐药情况和耐药机制２）；（采用脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）对这些地区人苍白杆茜进行同源性分析，明确所感染的茜株是否同源，，判断是散在性感染还是暴发流行性感染为预防和控制该地区医院感染提供理论依据。方法：２、收集２０１２年月至２０１３年５月从广州，北京，湖南和广州金域医学检验中屯分

7、ＵＷ离保存＾株非重复人苍白杆菌临床分离株。所有菌株经李工厂等人采用１６ＳｒＲＮＡＶｉｔｅｋ２ｏｍｔ－基因测序鉴定人苍白杆菌。（１）采用Ｃｐａｃ革兰阴性菌ＡＳＴＧＮ１３药敏鉴１定微量肉汤法检测１７株人苍白杆菌对１１种常见抗菌药物的最小抑菌浓度（ｍｉｎｉｍａｌｉｎｈ化ｉｔｏｉｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ＭＩＣ）（２）采用聚合酶链反应（ｐｏｌｅｃｈａｉｎ；ｙｍｅｒａｓｔｔ－ｒｅａｃｉｏｎ，