多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因及分子流行病学研究

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1、中图分类号：R89;R36;R39f”)

2、E_必謦SICHUANMEDICALUNIVERSITY硕士学位论文多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因及分子流行病学研究院（系）、所临床医学院研究生姓名卢灵锋学科、专业临床检验诊断学.:V:」总:'卜、：导师姓名刘靳波教授二〇—五年四月1目录多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因及分子流行病学研究…………………1中文摘要……………………………………………………………………4英文摘要……………………………………………………………………7前言…………………………………………

3、…………………………12第一部分多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布和耐药性分析1.1材料与方法…………………………………………………………151.1.1实验材料与仪器………………………………………………151.1.2实验方法………………………………………………………161.2结果…………………………………………………………………161.2.1标本来源………………………………………………………171.2.2科室分布………………………………………………………171.2.3药敏结果……………………………………

4、…………………181.3讨论…………………………………………………………………20第二部分多重耐药鲍曼不动杆菌相关耐药基因检测2.1材料与方法…………………………………………………………232.1.1实验材料与仪器………………………………………………232.1.2实验方法………………………………………………………232.2结果…………………………………………………………………252.2.1鲍曼不动杆菌相关耐药基因检测结果………………………252.2.2基因序列分析结果………………………………………

5、……27-2-2.3讨论…………………………………………………………………29第三部分基于PFGE的多重耐药鲍曼不动杆菌同源性分析3.1材料与方法…………………………………………………………323.1.1实验材料与仪器………………………………………………323.1.2实验方法………………………………………………………323.2结果…………………………………………………………………363.2.1PFGE各项条件探索结果……………………………………363.2.2PFGE图谱和聚类分析………………………

6、………………373.3讨论…………………………………………………………………39结论…………………………………………………………………………41参考文献……………………………………………………………………42英文词缩略表………………………………………………………………46致谢…………………………………………………………………………47鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药机制研究进展(综述)……………48-3-多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因及分子流行病学研究摘要鲍曼不动杆菌是一类非发酵的革兰阴性杆菌，为条

7、件致病菌。广泛存在于水、土壤、医院环境和人体皮肤表面，是医院感染的重要致病菌之一，主要引起获得性肺炎特别是呼吸机相关性肺炎、菌血症、尿路感染、继发性脑膜炎等。随着广谱抗菌药物和免疫抑制剂大量使用，对常用的β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等抗菌药物同时耐药的多重耐药鲍曼不动杆菌分离率明显增多，并在医院内广泛流行，给临床抗感染治疗带来极大的麻烦，同时对医院感染控制提出了新的挑战。对多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drugresistantAcinetobacterbaumannii，MDRAB)

8、的药敏试验和医院科室分布情况进行统计和分析，并检测相关耐药基因和对菌株进行同源性分析，从而指导医生合理使用抗菌药物，探讨我院多重耐药鲍曼不动杆菌产生的耐药机制，为我院预防与控制院内感染提供理论依据，给流行病学研究奠定基础。本研究收集四川医科大学附属第一医院2013年9月至2014年9月临床分离的62株非重复多重耐药鲍曼不动杆菌。利用MicroScanWalkAway96Plus全自动微生物鉴定/药敏测试系统进行鉴定、验证，琼脂稀释法检测菌株对23种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)，利用聚合酶链反应(

9、PolymeraseChainReaction，PCR)检测菌株的6种相关耐药基因(TEM、SHV、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24)的携带情况，将扩增所得的阳性产物送上海铂尚生物技术有限公司测序，将测序所得序列和GenBank数据库进行对比分析，并采用脉冲场凝胶电泳(PulsedFieldGelElectrophoresis，PFGE)对62株多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型并分析其同源性。结果显示：62株多重耐药鲍曼不动杆菌主要分离于痰液，其中40株分离于痰液标本，1