多重耐药鲍曼不动杆菌β

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1、多重耐药鲍曼不动杆菌β　　［关键词］多重耐药鲍曼不动杆菌;β内酰胺酶;基因型　　StudyontheGenotypeofβlactmasesinMultiresistantAciobacterBaumanniiStrain　　Abstract：ObjectiveToinvestigatethedistributionongenotypeofβLactmasesinmultiresistantaciobacterbaumanniistrainisolatedfromourhospital.MethodsThreedimemensionalextracttestsedt

2、odetectthestrainsofESBLsproducingandAmpCproducingandMBLproducingin15MultiresistantAciobacterbaumannii.ThegenotypeofβLactmasesethods.Results2strainsESBLsproducingand9strainsAmpCproducing,3strainsESBLsproducingplusAmpCproducingand3strainsMBLproducingpCproducinghavebeendetectedbythreedime

3、mensionalextracttests.All15strainshaveblaTEMgeneand2strainshaveblaPERgene,14strainshaveAmpCgeneandhaven'tMBLproducinggenebyPCRmethods.ConclusionThemostmultiresistantaciobacterbaumanniihaveblaTEMandAmpCgene,alittlestrainshaveESBLsofPERtypeandnoMBLofIMPtype.　　Keyannii;βLactmases;Genotype

4、　　鲍曼不动杆菌是院内感染的重要病原体之一，近年来，许多医院鲍曼不动杆菌的分离率在逐年上升，仅次于假单胞菌和大肠埃希菌。同时，多重耐药的鲍曼不动杆菌已成为医院感染的重要病原菌。在其复杂耐药机制中，产β内酰胺酶是其主要耐药机制［1］。鲍曼不动杆菌不仅有产广谱β内酰胺酶，而且近年来还发现有产超广谱β内酰胺酶、AmpC酶和碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌［2］，给临床治疗带来很大困难。为了解我院多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制，我们对本院分离的15株多重耐药的鲍曼不动杆菌进行了β内酰胺酶基因型研究。　　1材料与方法　　1.1菌株15株只对亚胺培南敏感的多重耐药鲍曼不动杆菌来自我院2

5、004年7月至2005年1月临床分离的标本，其中痰液12份（ICU6份，呼吸科4份、脑外科2份）、创面3份（均为骨科）。均经Vitek-32型全自动微生物鉴定仪（法国生物梅里埃公司产品）的VitekGNI鉴定卡统一进行鉴定。　　1.2标准菌株产ESBLs肺炎克雷伯菌ATCC700603、高产AmpC酶阴沟肠杆菌029M标准株由安徽医科大学第一附属医院惠赠；大肠埃希菌ATCC25922由本实验室保存。　　1.3耐药性被研究的15株鲍曼不动杆菌除了2株耐受亚胺培南，其他13株对亚胺培南全部敏感；对头孢哌酮/舒巴坦有1株敏感，14株中介；有1株对氧氟沙星和环丙沙星敏感；对

6、氧哌嗪青霉素/他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星、头孢他啶中介各1株；对其他抗生素均耐受。　　1.4主要试剂克拉维酸（CLA）为南京本原制药厂赠送，氯唑西林（CLO）为上海四药股份有限公司产品，MH琼脂为法国生物梅里埃公司产品，胰蛋白大豆肉汤为英国OXOID公司产品。　　1.5主要仪器设备微生物鉴定仪为法国生物梅里埃公司生产的Vitek-32型全自动微生物鉴定仪；冰箱为日本三洋MDF-382型超低温冰箱；离心机为德国Hettich公司产品MIKRO22R型低温超速离心机；PCR扩增仪为美国PERKINELMER公司9600型基因扩增仪。　　1.6酶提取物制备将分离鉴定的细

7、菌挑取数个菌落接种到30ml胰蛋白胨大豆肉汤中，35℃恒温振荡培育10h~14h，4℃4000r/min离心30min弃上清液，收集沉淀物加0.1mol/LPBS（pH7.0）400μl，旋涡混匀后于-80℃反复冻融6次，每次各1h，然后4℃13000r/min离心15min，吸取上清液，经过MH琼脂平板35℃培养过夜，无菌生长方为合格酶提取物，-80℃保存备用。　　1.7三维试验检测产AmpC酶菌株参照Coudron［3］报告的酶提取物三维试验作部分改进。将0.5麦氏单位大肠埃希菌ATCC25922菌液均匀涂布在MH琼脂平皿上，平皿中心贴上30μgFOX纸片，