日本血吸虫表膜蛋白sjost48的初步研究

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1、密级：论文编号：中囯农他科学院学位论文日本血吸虫表膜蛋白SjOST48的初步研究ThePreliminaryStudyonSchistosomajaponicumTegumentalProteinSjOST48硕士研宂生：刘艳涛指导教师：林矫矫研宄员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：上海兽医研究所研究生院2015年5月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含$他人已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对

2、本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研宄生签名：时间：年6月/曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研宄生签名：时间：MLT年6月/日导师签名:时间:年<月乙曰中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目日本血吸虫表膜蛋白SjOST48的初步研究论文作者刘艳涛专业领域兽医,研究方向不区分研究方向指导教师林矫矫培养

3、单位(研究所、中心）:上製m_所姓名职称单位专业T遺岑A:、!朱建国教授上海交通大学预防兽医学y，L/、//评r，U,./阅陈兆国研究员上海兽医研究所预防兽医学^人答辩程训佳教授复旦大学预防兽医学主Z)席朱建国教授上海交通大学预防兽医学A冯新港研究员上海兽医研究所预防兽医学答刘金明研究员上海兽医研究所预防兽医学辩朱传刚副研究员上海兽医研究所预防兽医学委贝会议记录（秘书）顾惠明论文答辩时间地点2015年5月27円，上海兽医研究所密级:论文编号:中国农业科学院学位论文日本血吸虫表膜蛋白SjOST48的初步研究ThePreliminaryStudyonSchistosomajaponicumTe

4、gumentalProteinSjOST48硕士研究生：刘艳涛指导教师：林矫矫研究员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：上海兽医研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationThePreliminaryStudyonSchistosomajaponicumTegumentalProteinSjOST48M.S.Candidate：YantaoLiuSupervisor：Prof.JiaojiaoLinDegree：MasterofVeterinaryScienceSpecialty

5、:VeterinaryMedicineMay2015摘要日本血吸虫病是我国重点防控的人畜共患寄生虫病，对我国人民的身体健康和畜牧生产造成了重大损害。防治实践表明吡喹酮只针对成虫有效且不能避免重复感染，单靠吡喹酮药物治疗不能有效控制血吸虫病，因此，筛选、鉴定高效且安全的血吸虫病疫苗成为血防工作者们的努力方向。体被表膜蛋白被证明是血吸虫潜在的疫苗和药物靶标，具有很好的研究价值。本实验室前期在开展日本血吸虫体被蛋白组研究时鉴定到了SJCHGC01743蛋白，本文对该蛋白编码基因进行了克隆、表达，对其基本特性和生物学功能进行了初步的研究。为了鉴定日本血吸虫SJCHGC01743基因并评估其重组蛋白作为

6、新的血吸虫病候选疫苗抗原的潜力，本研究利用PCR技术首次扩增了该基因，获得了1248bp的cDNA序列。同源性分析结果显示，该基因为日本血吸虫寡糖转移酶OST48亚基，命名为SjOST48。实时定量PCR分析显示SjOST48在检测的童虫和成虫各个期别虫体中均有转录，其中在28d虫体中的转录水平最高，在42d雌虫中的转录水平显著高于雄虫。构建了重组表达质粒pET-28a(+)-SjOST48，并在大肠杆菌中成功表达，重组蛋白rSjOST48分子量约50kDa。应用重组蛋白rSjOST48免疫BALB/c小鼠制备免疫血清，Western-blot分析表明rSjOST48具有较好的免疫原性。间接免

7、疫荧光试验表明SjOST48蛋白主要分布于虫体体被，少量分布于实质。ELISA检测结果表明rSjOST48能诱导产生较高的特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体。两次动物免疫保护试验结果表明SjOST48分别诱导小鼠产生了21.58%-32.62%(P<0.05）的减虫率和50.94%-57.61%(P<0.01）的肝脏虫卵减少率。为了探究SjOST48基因的生物学功能，本研究利用RNAi技术对该