三角帆蚌cam和ets基因的克隆及镧对其表达的影响

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1、１：０３６４分类号：巧１单位代码‘：１２７２０１９１密级：公开学号学位论文Ｈ角帆畔ＣａＭ和巧Ｓ基因的克隆及綱对其表达的影响ＣｌｏｎｉｎｇｏｆｔｈｅＣａＭａｎｄＥｔｓＧｅｎｅｆｒｏｍＨｙｒｉｏｐｓｉｓｃｕｍｉｎｇｉｉａｎｄＴｈｅｉｒＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｕｎｄｅｒＬａｎｔｈａｎｕｍＥｘｐｏｓｕｒｅ研究生：魏敏；指导教师：万令教授申请学位口类级别：发挙硕击专业名称；动物遗传育种与繁殖研究方向；动物分子遗传学与育种所在学院；

2、动物科技学院答辩委员会主席；？＞２０１５年６月AnhuiAgriculturalUniversityMasterDegreeThesisCloningoftheCaMandEtsGenefromHyriopsiscumingiiandTheirExpressionunderLanthanumExposurePostgraduate:MinWeiSupervisor:Prof.QuanWanCollegeofAnimalScienceandTechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,H

3、efei230036Hefei,Anhui,P.R.ChinaJune,2015独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取。，论得的研究成果据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽过的材料一农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢曆、０学位论文作者签名ｋＬ專签字曰親々１年曰文］：＾月＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农

4、业大学有关保留、使用学位论文的印件和电子文件，规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据》、缩、汇编学位论文，向狂库，可采用影印印或扫描等复制手段保存）。会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书；学位论文作者签名；指导教师签名签字日期：禾〇｜Ｓ年女月《日签字日期：兴ｆｃＴ年６月《日：学位论文作者毕业后去向电话：工作单位；由；；ｔ也由！：区奪

5、裔ｆｉｆ言：本论文受以下项目资助基金项目：浙江省自然科学基金(LY12C19010)，浙江省“十二五”水产育种重大专项（2012C12907-5,2012C12907-9）摘要钙调蛋白（Calmodulin，CaM）是一种广泛存在于动植物细胞内的Ca2+受体蛋白，调节多种酶的活性，并参与介导生命活动进程的炎症反应、代谢、细胞凋亡、肌肉收缩、细胞内运动、神经生长以及免疫应答等活动，还在增强抗肿瘤、抗精神病、大脑记忆等方面有临床应用，表现出了良好的医学应用前景，因此对钙调蛋白调节机制的研究愈加广泛而深入，但目前对贝类钙调蛋白及其功能的

6、研究所知甚少。为了探讨三角帆蚌钙调蛋白（hcCaM）介导的Ca2+信号通路的机制，本研究克隆并鉴定了hcCaM基因和三角帆蚌转录因子（erythroblastosis-twentysix，Ets）（hcEts）基因；并且探讨了镧离子（Lanthanum，La3+，与Ca2+离子空间结构十分相似）对hcCaM和hcEts基因表达及CaM下游蛋白碱性磷酸酶（Alkalinephosphatase，AKP）活性的影响。结果如下：1、hcCaM基因片段长562bp，含有一个完整的450bp开放阅读框，编码一个149个氨基酸的蛋白，具有CaM蛋白的

7、特征性结构—4个EF-hands结构域，hcCaM与其它无脊椎动物和脊椎动物具有很高的同源性（95.3%-96.6%）；此外，系统进化树同样证明它在无脊椎动物和脊椎动物中均十分保守。hcEts片段长777bp，包含一个完整的阅读框，编码一个含258个氨基酸的蛋白，并具有Ets家族蛋白的特征性结构—ETS结构域。hcEts基因是首次在无脊椎动物淡水珍珠蚌（三角帆蚌）中克隆并鉴定出的Ets转录因子基因。hcEts与其它动物的的同源性为27.91%-87.1%，与瓜蟾和家鸡最低，为27.91%；与栉孔扇贝最高，为87.1%；此外，系统进化分析表

8、明hcEts和栉孔扇贝Ets基因遗传地位相似。2、La3+对hcCaM基因表达影响的研究结果：LaCl3处理后24、72和168h，hcCaM的表达极显著提高（P<0.01）；LaCl3+三氟