卵形鲳鲹ppa rα及cpti基因的克隆及不同条件对其表达影响的分析

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1、和CPTI基因的表达变化趋势，研究激动剂对卵形鲳鳢PPAR倪和CPⅣ基因表达的影响。结果显示，在非诺贝特浓度组中，50mg／kg的浓度下，PPAR仅基因的表达量显著高于其他组(P<0．05)，而CPTI在20mg／kg的浓度下有较高的表达水平(P

2、时达到最高值(尸<0．05)。实验中PBS对照组PPARa和CPTI基因的表达量均无显著性差异(P>O．05)，且非诺贝特实验组PPAR口和CPTI基因的表达量均高于PBS对照组，即非诺贝特可诱导PPARa基因的表达，但c尸”与PPARa基因表达并没有较明显的变化趋势相关性。4、不同温度对PPARa及CPTI基因表达的影响分析将卵形鲳鲣分别置于16℃、19℃、22℃、25℃和28℃的温度中进行温度刺激，并采用RT-PCR检测肝脏、肌肉组织中两基因的表达情况。结果表明，将卵形鲳鳢从暂养水体直接放入16℃、19℃、2

3、2℃、25℃的控温水槽中时，尸剐尺n和CPTI基因表达量随时间都有上调趋势，其中，16℃和19℃时，无论在肝脏还是肌肉组织中，两基因表达上调显著(P0．05)，其中CPTI基因在各时间点呈现缓慢的起伏变化，并在48h时低于初始值。5、饥饿对PPARd及CPTI基因表达的影响分析对卵形鲳鳄进行短期饥饿胁迫，利用实时荧光定量来检测饥饿条件下卵形鲳鳢肌肉和肝脏中PPAR口和CPTI的表达情况，为探讨两

4、基因的功能、作用机理以及调控鱼类脂肪沉积的研究提供参考资料和理论依据，同时为开展鱼类饥饿生理的研究在学术和应用上发挥着重要价值。本研究结果显示，PPAR仅和CPTImRNA在肌肉组织中的表达量随时间的变化是先降低后升高，在达到32---48h处到达一个最大值后又降低，在肝脏组织中，两基因随时间先升高后降低。另外，饥饿组CPTI基因的表达量普遍高于正常投喂的对照组，而PPARa基因表达量只有在最大值时超过对照组，其他时间点都低于对照组，这可能与这两基因的主要功能有很大关系，CPTI基因与脂肪转化为能量直接相关，在饥

5、饿条件下要将脂肪转化为维持鱼体新陈代谢和生命活动所需的能量，所以表达量比正常条件下更高。关键词：卵形鲳鳇，PPAR0：，CPTI，生物信息学分析，非诺贝特，温度梯度，饥饿万方数据MolecularCloningandExpressionUndertheDifferentConditions。’PeroxisomeolreroxlsomeProliferatorgroilleraReceptors一仅andCarnitine』』一PalmitoyltransferaseIin1ractttnotHSovntHsAb

6、stractThefull—lengthCDNAofPPARaandCPT／geneinZovaluswerecloned．Tissuesexpressionandtheinfluenceoftheexpressionofthemunderthreedifferentconditionsaswellasdiscussedinthispaper．Theresultsfollow：1．clonedandanalyzedofthefull·lengthcDNAofPPARaandCPr／geneThefull—leng

7、thCDNAofPPARaandCPT1inZovatuswereclonedbyRACE(RapidAmplificationofCDNAEnds)，andtheproteinstructures，physical，chemicalpropertiesandtheirfunctionaldomainstructureswhichencodedbyPPARnandcPTIgenewereanalyzedbybioinformaticsmethod．TheresultsshowedthatcDNAsequenceo

8、fPPAR0【inZovaluswas1930bp，andtheopenreadingframewas1425bp，encoding474aminoacid(GenBankaccessionNo．KP893147)．Theproteinwasunstableproteinwithoutsignalpeptideandtrans—membrane．Thesecondarys