基于uhplc-qtofms代谢组学技术对猪尿中β_2-受体激动剂残留的研究

《基于uhplc-qtofms代谢组学技术对猪尿中β_2-受体激动剂残留的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：单位代码：密级学号：博士学位论文基于代谢组学技术对猪尿中受体激动剂残留的研究研究生吴玉苹指导教师丁双阳研究员合作指导教师夏儀副教授申请学位门类级别农学博士专业名称基础兽医学研究方向兽医药理学与毒理学所在学院动物医学院年月Ph.D.DissertationMetabonomicapproachbasedonultra-highperformanceliquidchromatography-quadrupoletime-of-flightmassspectrometryforurineprofilingofswi

2、netreatedwithp2-agonistsPh.D.Candidate:WUYupingSupervisors:Prof.DINGShuangyangAssociateProf.XIAXiMajor:BasicVeterinaryMedicineResearchField:VeterinaryPharmacologyandToxicologyCoCollege:llegeofVeterinaryMedicineChinaAgriculturalUniversityJune,2015独创性声明本人声明所呈交的学位

3、论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：时间：日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业

4、大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）学位论文作者签名：时间：年月々日导师签名：时间：年月之日本研究由公益性行业（农业）科研专项资助摘要受体激动剂高剂量使用时由于能显著提高胴体的瘦肉率和显著增重，常被非法用于畜牧业养殖业中，但其残留易通过食物链进入人体危害人类健康，我国已禁止使用。监测此类物质的非法使用一般采用仪器或靶向检测方法。然而，随着新的类似物不断合成和使用方式变化，传统监测将面

5、临巨大的挑战。非靶向代谢组学具有可以大规模的定性和半定量分析复杂生物样品中小分子代谢物的优势，本文旨在基于代谢组学技术对卩受体激动剂在猪尿中的残留进行研究，建立检测受体激动剂的新方法。首先基于超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱技术对克伦特罗干扰的大鼠尿液进行生物标志物的筛选，建立了尿液中非靶向代谢组学的方法。以大鼠为模型动物，只大鼠随机分为四组：低、中、高剂量三个实验组和空白对照组。克伦特罗药物干扰后连续收集尿液，运用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱分析，数据用软件处理。结果显示低、中剂量组的大鼠尿液中的代谢物变化不显

6、著，克伦特罗高剂量组的大鼠尿液中蹄选出了潜在生物标志物。运用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱技术平台，初步建立了尿液中代谢组学的研究方法。其次应用建立的代谢组学方法对受体激动剂干扰后的猪尿样品进行研究。应用非靶向代谢组学技术对单独和小剂量混合使用克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的猪尿样进行了分析，筛选出共同的生物标志物。头猪随机分为四组，其中三组分别饲喂含的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺的饲料，一组饲喂添加上述三种药物各的饲料，连续饲喂天，用药前小时的每头猪的尿液作为空白对照，停药后分别在、、、、、、、、、、、、、、、

7、、、、、、和天采样，对收集到的近个尿样运用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱分析，进而利用多元统计分析进行数据处理，比较药物干扰组和对照组，筛选出可能的生物标志物，本实验筛选生物标志物的离子选择标准如下：（值；倍数变化离子强度。对筛选出的离子再使用、、、等数据库进行鉴定，最后利用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱技术对所得到的共同的可能生物标志物与标准品对比鉴定出这两种物质分别是剛哚甲酸（和氟米龙醋酸酷（最后，基于共同的生物标志物建立检测受体激动剂的分析方法。针对尿液中共同的生物标志物，优化了前处理方法，确定固相萃取柱作

8、为尿液的净化优化了检测的质谱条件，建立了超高液相色谱串联四极杆质谱的仪器方法。运用此方法对采集的份尿样进行了检测，结果份疑似阳性。随之对份疑似阳性样品运用传统检测激动剂的超高液相色谱串联四极杆质谱方法进行确证，结果显示份疑似阳性样本分别为沙丁胺醇和氯丙那林。随之运用随机抽取检测结果为阴性并经仪器验证的份空白尿样初步确定了受体激动剂检测中生物标志