胶体金免疫层析法快速定量检测猪尿中β2-受体激动剂残留的研究

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1、分类号:密级:UDC:学号:405605012179南昌大学硕士研究生学位论文胶体金免疫层析法快速定量检测猪尿中02-受体激动剂残留的研究TheResearchofColloidalGold-basedImmunochromatographyAssayforRapidandQuantitativeDetectionofB2-agoni$tResiduesinSwineUrine彭涛培养单位(院、系):食品学院食品科学与技术国家重点实验室指导教师姓名、职称:赖卫华博士、教授申请学位的学科门类:工学硕士学科专业名称:农产品加工及贮藏工程论文答辩F!期

2、:2015年5月25R答辩委员会主席:评阅人:_______________IIf.2015年5月一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研宄成果,也不包含为获得南昌大学或其他敦音和构的学位或证书而使用过的材料。与我--同丨:作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写):签字曰期:年‘月+曰二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留'使用学位

3、论文的规定,同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印'缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北朵万方数据股份冇限公司和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表,并通过网络向社会公众提供信息服务,同意按“章程”规定享受相关权益。{1/学位论文作者签名(鸭)导师签名(手写):签字曰期:外/]、年g月4目____________签字

4、日期:#/]•年‘月4■日论文题S姓名ii私学号论文级别博土□硕1-5院/系/所专业「枳户备加蠃與口公幵□保密(向校学位办申请获批准为“保密”,______年__月后公开)摘要摘要传统的胶体金免疫层析方法主要是通过肉眼观察检测线的有无来判断检测结果,对待测物进行定性或者半定量检测,检测结果易受温度、光线等环境因素和检测者的主观因素影响。基于胶体金光学读取仪的胶体金免疫层析快速定量检测方法具有速度快、操作简便、灵敏度高、可定量检测、数据可存储、适合现场快速筛查等优点。本研究旨在建立胶体金免疫层析快速定量检测平台并初步探讨影响其稳定性的主要因素,为推

5、广胶体金免疫层析快速定量检测方法的应用提供理论依据和基础数据。近年来,盐酸氯丙那林作为一种新型的“瘦肉精”使用,该药物在动物体内代谢缓慢且具有蓄积毒性,通过食物链的传递易对人类的健康造成危害。本研究成功建立了基于HG-8胶体金光学读取仪快速定量检测猪尿中氯丙那林残留的方法。通过优化实验参数,该方法能在9分钟内快速分析检测尿样中的氯丙那林,最低检测限为0.15μg/L,在3.0μg/L和20.0μg/L之间有良好的线性关系2=0.997),与其它5种β(R2-受体激动剂没有明显的交叉反应。为了验证本方法的准确性,用本方法与高效液相串联质谱法同时检测

6、20个阴性猪尿加标样品,两种方法的检测结果有良好的相关性。本方法具有便捷灵敏、特异性强的特点,能在现场快速检测尿样中的氯丙那林残留。在动物养殖业中,盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等三种β2-受体激动剂(β2-agonist)药物常用于促进动物生长及提高饲养动物的瘦肉率,本研究以克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等三种胶体金免疫层析快速定量检测试纸条为对象,通过60℃加速保存实验得出影响胶体金定量试纸条稳定性的主要因素是质控线(C线)的稳定性。莱克多巴胺试纸条相比于其它两种试纸条的稳定性较好,而克伦特罗和沙丁胺醇试纸条在加速保存实验中检测线(T线)

7、稳定C线下降明显,导致T/C上升显著。本研究分别在克伦特罗和沙丁胺醇两种试纸条的二抗稀释液中均添加5%(v/v)的WellChampion抗体保护剂,NC膜在60℃条件下干燥24小时,两种试纸条的稳定性均得到了有效提高。同时,本研究建立了胶体金免疫层析快速定量检测平台,检测猪尿中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇三种β2-受体激动剂的最低检测限分别为0.19μg/L、I摘要0.39μg/L和0.83μg/L,回收率在86.6%~109.7%之间,变异系数为4.7%~14.7%;检测猪肉中三种目标物的最低检测限分别为0.43μg/kg、0.52μg/k

8、g和1.01μg/kg,回收率为71.2%~101.6%,变异系数为7.2%~17.9%。对不同地区的135个不同猪尿样本和江西国鸿食品

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