免疫荧光层析法快速检测猪尿中克伦特罗含量

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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2013,Vol.29,No.5免疫荧光层析法快速检测猪尿中克伦特罗含量郭诗静，唐海波，齐维（广州万孚生物技术股份有限公司，广东广州510663）摘要：本研究使用克伦特罗免疫荧光层析试剂盒，基于免疫荧光层析原理，配套使用广州万孚生物技术股份有限公司研制的荧光定量检测仪，实现猪尿中所含克伦特罗的定量检测，并对试纸条的灵敏度、准确度与精密性、类似化学药物干扰、保存期等相关性能进行了评价。实验证明检测限达0.26μg/L，与结构类似化学药

2、物的交叉反应小于0.20%，同时验证了本试剂盒在1年的保存期限有效。整个检测过程只需20min左右。关键词：克伦特罗；免疫荧光层析法；检测文章篇号：1673-9078(2013)5-1154-1156RapidDetectionofClenbuterolContentinPigUrinebyImmunofluorescenceChromatographyGUOShi-jing,TANGHai-bo,QIWei(GuangzhouWondfoBiotechCo.,Ltd,Guangzhou510663,C

3、hina)Abstract:Quantitativedetectionoftheclenbuterolinpigurinewasinvestigatedwithaclenbuterolkitbasedonimmunofluorescencechromatographyandafluorescencequantitativedetector.Thedetectionlimitwasupto0.26μg/Landthecross-reactionwiththechemicaldrugsofsimilarst

4、ructurewaslessthan0.20%.Andtheexperimentconfirmedthatthekithad1-yearshelflife.Thetotaldetectionprocessjusttakesabout20minutes.Keywords:clenbuterol;immunofluorescencechromatography;detection克伦特罗（Clenbuterol）俗称瘦肉精，是一种β2-中克伦特罗的定量检测，同时也具有胶体金试纸条的肾上腺素受体激动剂，临床上

5、经常用来治疗慢性阻塞快速、方便等特点，是一种很有应用前景的方法。现性肺病，亦被作为缓和气喘急性发作时的支气管扩张将其性能评价结果报告如下。用药。由于其毒副作用明显，包括我国在内的许多国1材料与方法家已严禁克伦特罗在畜牧生产中使用。目前检测动物组织中克伦特罗的方法较多，有色1.1试剂与仪器谱法、质谱与色谱联用法、电化学法、免疫酶法等[1]。标准品：克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、酒色谱法和质谱-色谱联用法等仪器法的灵敏度和准确石酸托特罗定、盐酸特布他林、盐酸环仑特罗、盐酸度较高，有些方法的灵敏度能达到0.

6、1ng/g[2~3]，一般妥洛特罗均购自中国食品药品检定研究院。为确证方法，但由于仪器昂贵、操作复杂，不适用于克伦特罗荧光层析试剂盒：由万孚公司研制。基层单位的大规模样本筛检。而筛查方法用得较多的“安测”荧光定量仪：由万孚公司研制。是胶体金法，该法简便快捷，成本低，但灵敏度略显猪尿样本：收集自本地屠宰场。不足，且一般只能定性，目前市售产品的灵敏度多为标准品稀释液：取10份阴性猪尿等比例混合。3μg/L~5μg/L。1.2测定原理为此，我公司研制了克伦特罗免疫荧光层析试剂采用竞争性免疫荧光层析法检测猪尿中

7、克伦特罗盒及“安测”荧光定量仪，该系统能初步实现对猪尿浓度，将样本与各试剂混合后滴加至检测卡的加样孔收稿日期：2012-12-11中，在层析作用下反应复合物沿着硝酸纤维素膜向前项目支持：广东省发改委工程实验室建设项目（粤发改高技术[2010]1286移动，包被在膜上的抗原与样本中的克伦特罗竞争结号）合荧光标记的抗体。样本中所含药物越多，膜上聚集作者简介：郭诗静（1983-），女，硕士，主要从事快速诊断试剂研究的复合物则越少，荧光信号强度便越弱。通过荧光定通讯作者：唐海波量仪扫描荧光信号强度，与标准曲线所

8、拟合的方程进1154现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2013,Vol.29,No.5行换算，可得出样本中克伦特罗的浓度。的回收率与测试精密度。1.3实验方法1.3.6类似化学药物干扰试验1.3.1样本与试剂盒准备对β-兴奋剂类似化学药物进行交叉反应的测定，1.3.1.1样本：取本地屠宰场采集的10份猪尿，经在阴性尿样中添加莱克多巴胺、沙丁胺醇、酒石酸托ELISA法测定为阴性（克伦特罗药物浓度小于0.1