胶体金免疫层析法快速检测c反应蛋白的研究

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1、单位代码；１０４７２学术学位囚专业学位口；１２１２１中图分类号学号００；密级：ｆｅ斬ｌ＃ｉ硕±学位论文胶体金免疫层析法快速检测Ｃ反应室白的研究ＤｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆａＲａｉｄＣｏｌｌｏｉｄａｌＧｏｌｄｐｐＩｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＡｓｓａｙｏｆＣ民ｅａｃｔｉｖｅＰｒｏｔｅｉｎ：李静芳作者姓名导师姓名：王云龙教授学科ｎ类：临巧医学专业名称：临巧檢驗讼断学培养院系：民学檢驗学院？，’，二〇—完成时间：节年Ｈ月ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａＲａｐｉｄＣｏｌｌｏ

2、ｉｄａｌＧｏｌｄＩｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＡｗａｙｏｆＣＲｅａｃｔｉｖｅＰｒｏｔｅｉｎＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＣａｎｄｉｄａ化：ＬｉＪｉｎｇｆａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＷａｎｇＹｕｎｌｏｎｅｐＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中蒋别加Ｗ

3、祿注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经。Ｌ发表或撰写的成果作品对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中乂明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。。：作者签名：日期＾巧年义月曰４井５＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子脱允许论文被査阅和借阅。本人授权新乡医学院可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库涨厅检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。＂＂本学位论文属于（请在Ｗ下相应

4、方框内打Ｖ）：１．。，在保密□＿＿年解密后适用本授权书２．不保密口。＂＇作者签名：日期：女年、月ＶＳ导师签名；＾日期：，年月＾＾／２＾＾＾＾；目录摘要１一第部分前言６第二部分材料和方法１１第兰部实验錦２６第四部分讨论４０第五部分结论４３参考规４４文献综述４９参考文献５８Ｂ＾６１攻读学位期间发表文章情况６２ｍｍ６３个人简历６４新乡医学院硕壬学位论文胶体金免疫层祈法快速检测Ｃ反应蛋白的硏究摘要背景Ｃ反应蛋白（Ｃｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｉｉ

5、ｊＣＲＰ）自从在急性感染者血液中被发现后，因能够反应感染性疾病的动态变化，已被临床上广泛应用于炎症的辅助诊断化相关的检测方法、产品不断涌现，但目前获批的ＣＲＰ定量检测相关产品均需要借助设备来完脱不适合现场、社区医院、乡村等基层医巧机构使用。因此，研究开发不需要借助任何设备即可快速检测ＣＲＰ含量的胶体金免疫层析试纸条具有重要的临床价值和社会意义。目的建立基于自制化色卡半定量检测ＣＲＰ含量的双抗体夹也胶体金免疫层析法方法１ＲＰ．Ｃ比色卡定值点的确定，：根据临床诊断标准确定比色卡Ｈ个定值点。２．ＣＲＰ室内质控晶的制备；利用ＣＲＰ低值血清

6、作为基质血清稀释ＣＲＰ高值血清一，另外添加类风湿因子、兰醜甘油等干扰物质制备系列室内质控品，并采用罗氏试剂进行复核。３．ＣＲＰ试纸条的制备及工艺优化：采用梓臀酸云钢还原法制备不同粒径的胶体金，采用功能性实验确定胶体金最优粒径、最佳ｐＨ和蛋白标记量、最佳蛋白包被量；采用正交实验确定样品垫处理液的成分及含量、血、血；通过全血浆清的稀释倍数研究确定不同标本的稀释倍数，制备比色卡，并在实验基础上将反应体积放大１００倍，验证工艺的稳定性。４．、精密化、试纸条性能评化选用室内质控品对试纸条的灵敏度、批间差恃异性、钩状（ＨＯＯＫ）效应、稳定性、检测

7、环境条件等进行研究。５．实验室临床标本检测：从中也标本库选２００份临床标本进行检测并与对照试一。剂对照，确认致性１新乡医学院硕生学位论文结果１．确定ＣＲＰ比色卡王个定值点由浅到深分别为１０ｌ／ｍＬ、５０／ｍＬ、１００／ｍＬ。＾ｇ鸭ｎｇ２．配制ＣＲＰ室内质控晶１４份；含类风湿因子（１５０ＩＵ／ｍＬ）、Ｈ酷甘油（１６ｍｍｏｌ／Ｌ）和不含干扰因素的ＣＲＰ终浓度分别为５ｎｇ／ｍＬ、１０帖／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ、１００ｉ－ｉｇ／ｍＬ样本共１２份．５７ＺｍＬ），ＨＯＯＫ效应样本（ＣＲＰ１０