间充质干细胞的条件培养上清影响pc12细胞帕金森病模型增殖的作用研究

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1、单位代码：１０４７２学术学位ｄ专业学位口学号；１２０３００３中图分类号３：民７４．３密级：公开斬Ｉ多ｉ硕±学位论文间充质干细胞的条件培养上清影响ＰＣ１２细胞帕金森病模型增殖的作用研究Ｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｓｕｐｅｒｎａ化ｎｔｏｆＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｆＰＣ１２ｃｅｌｌｍｏｄｅｌｏｆＰａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ作者姓名；刘晏导师姓名：李形教授学科口类：临床医学专业名称：神经病学一培养院系

2、：第临床学院—完成时间；二〇五年四月ＴｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｓｕｅｒｎａｔａｎｔｏｆＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｐｓｔｅｍｃｅ化ｏｎ化ｅｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｆＰＣ１２ｃｅｌｌｐｍｏｄｅｌｏｆＰａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＬｉｕＭｉｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ；Ｐｒｏｆ．ＬｉＴｏｎｇＴｈｅＦｉｒｓｔＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＳ化ｏｏｌＸｉｎｘｉａｎ

3、ｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进斤研究所取得的研究成果。除了文中特别加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名＇：去日期；以巧年＾月个日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允

4、许论文被查阅和借阅。本人授レｉ权新乡医学院可：？将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。＂＂本学位论文属于（请在Ｗ下相应方框内打Ｖ）：１．保密□，在年解密后适用本授权书。＿２．不保密口。＇ｒ作者签名：日期：ＭＳ年月Ｖ日Ｘｆ－—〇【Ｓ、导师签名：日期：ｙ年月＞日目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３刖胃５实验Ｗ抖８实验施１１实验淵１８９１２结５附图２６参考文献２９综述３３：造血调控

5、因子在神经系统中的作用附录４４攻读学位期间发表文章情况４６ａ谢４７个人简４９新乡医学院硕±学位论文间充质干细胞的条件培养上清影响ＰＣ１２细胞帕金森病模型增殖的作用硏究摘要背景间充质干细胞（ＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）可Ｗ通过分化为神经元样细胞、调节免疫和诱导原位神经生长因子的分化等机制发挥神经修复及促进神经系统生Ｅ－３ｌ２－长的作用。粒细胞集落刺激因子（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＧＣＳＦ）可Ｗ促进神经分化和神经元增

6、殖、抵抗神经系统病变时的炎症，具有明显的对神经系＇统的保护作用，可Ｗ促进神经损伤时结构的重建与功能的修复。帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｓ一ｄ－ｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）是种中脑黑质纹状体通路内的多巴胺能神经元进行性退变为主要病理特征的病变。我们运用ＭＳＣｓ的条件培养上清刺激ＰＣ１２细胞的帕金森病细胞模型的增殖－，Ｗ此验证ＭＳＣｓ的促神经生长作用，并且推测其中含有ＧＣＳＦ的条件培养上清促进实验细胞增值的作用更强。目的分离、培养Ｗ及鉴定间充质干细胞，探讨其条件培养上清对ＰＣ１２细胞及该细胞帕金森病模型增殖的影响。方法我們采用组

7、织块贴壁法从脫带组织中分离出长梭形细胞，后用流式细胞术鉴定其免疫表型，用染色法鉴定其成脂与成骨分化能力；用Ｍｐｐ＋处理ＰＣ１２细胞的方法建立ＰＤ细胞模型；之后用刀豆素Ａ（ｃｏｎＡ）刺激ＭＳＣｓ后收集其条件培养上清，比较观察其与正常ＭＳＣｓ上清对ＰＣ１２及其ＰＤ模型增殖能力的影响，并用酶联免疫Ａ－吸附法化ＬＩＳ）检测两种上清内粒细胞集落刺激因巧ＧＣＳ巧的含量。结果１．应用组织块贴壁法分离巧带间充质干细胞，对分离得到的细胞培养后进行免疫表型鉴定示其高表达干细胞表面标志ＣＤ１０５、ＣＤ７３、ＣＤ９０，而不表达造血细胞表面标

8、志ＣＤ１９、ＣＤ３４和ＣＤ４５，符合ＭＳＣｓ表型特征。２．用Ｗ上同样方法检测加入诱导剂ｃｏｎＡ的ＭＳＣｓ