间充质干细胞培养上清对小鼠毛发周期的影响的研究

《间充质干细胞培养上清对小鼠毛发周期的影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R751.05单位代码：10159密级：公开学号：201520230硕士学位论文中文题目：间充质干细胞培养上清对小鼠毛发周期的影响的研究英文题目：EffectofBMSCsconditionedmediaonmurinehaircycle论文作者：姜天灵指导教师：李远宏教授学科专业：皮肤病与性病学完成时间：2018年3月I中国医科大学硕士学位论文间充质干细胞培养上清对小鼠毛发周期的影响的研究EffectofBMSCsconditionedmediaonmurinehaircycle论文作者姜天灵指导教师李远宏教授申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医

2、学二级学科皮肤病与性病学研究方向皮肤激光美容论文起止时间2016年3月—2018年3月论文完成时间2018年5月中国医科大学（辽宁）2018年3月中国医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：本论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果，论文中除加以标注的内容外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本研究提供贡献的其他个人和集体均已在文中进行了明确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年月日中国医科大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使

3、用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权中国医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密（），在年后解密适用本授权书。（保密：请在括号内划“√”）论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日中国医科大学硕士学位论文摘要目的：本研究针对骨髓间充质干细胞培养上清可能对毛囊从休止期进入生长期产生影响展开，建立小鼠动物模型，探究这种影响机制与Wnt信号通路激活的关系。为进一步研究提供方向。研究方法：本研究对骨髓间

4、充质干细胞进行提取和体外培养，在培养细胞的特定时间点获取培养上清。将C57BL/6小鼠随机分为3组，每组10只，分别在背部剃毛区注射BMSCs培养12天上清、培养15天上清或未培养细胞的培养基，隔日注射1次，共处理5次，隔日观察小鼠生存状况及大体皮肤变化，根据小鼠毛囊从休止期进入生长期的速度，选择较快者为最优模型。确定最优模型后，分别在处理后7、10、14天取对应试验组与对照组皮肤组织进行HE染色光学显微镜观察，验证模型建立成功。建模成功后，分别取对应试验组与对照组处理后7、14天皮肤组织，qPCR检测Wnt/β-catenin信号通路关键目的基因mRNA表达水平，对比

5、试验组与对照组间是否存在差异，并应用SPSS20.0统计软件进行数据统计分析，双侧p＜0.05认为差异有统计学意义。结果：排除麻醉死亡及有明确干扰因素的小鼠3只，共27只小鼠完成建模处理，观察至处理后4周时27只小鼠仍存活。处理后第6天开始，注射BMSCs培养12天上清的试验1组小鼠毛囊最先进入生长期，至第14天共6只小鼠毛囊进入生长期；注射BMSCs培养15天上清的试验2组小鼠从第12天开始毛囊逐渐进入生长期，至第14天共2只小鼠毛囊进入生长期；观察对照组小鼠至处理后第14天，未见小鼠毛囊进入生长期。HE染色显示第7天时试验1组小鼠毛囊进入生长期IIIa阶段，第10天

6、时试验1组小鼠毛囊进入生长期IIIc阶段，第14天时试验1组小鼠毛囊进入生长期VI阶段；第14天时对照组小鼠毛囊仍处于休止期。处理后7天，与对照组相比，试验1组β-cateninmRNA的表达水平较对照组升高，差异有统计学意义；处理后14天，与对照组相比，试验组β-catenin、Lef1、Tcf1mRNA表达水平较高，差异有统计学意义，抑制因子DKK1mRNA表达水平在组间无统计学差异，其余所检目的基因mRNA在试验组与对照组间无统计学差异。结论：在小鼠皮内注射小鼠原代BMSCs培养上清可促进小鼠毛囊从休止期加速进入生长期，应用BMSCs培养第12天上清时促进作用更显

7、著，并且对I中国医科大学硕士学位论文于小鼠生存状态没有明确影响；BMSCs培养上清处理后Wnt/β-catenin信号通路关键影响因子中β-catenin、Lef1、Tcf1mRNA表达水平升高，而DKK1表达水平不变，提示其影响机制可能与促进Wnt/β-catenin信号通路激活有关。关键词：骨髓间充质干细胞；毛发周期；Wnt信号通路；β-cateninII中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective：WepreparedconditionedmediafromculturingmouseBMSCstoinvestigat