mir-139-3p在胃癌组织中的表达及其对细胞增殖和凋亡的作用

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1、温州医学院硕士学位论文论文题目:miR-139—3p在胃癌组织中的表达及其对细胞增殖和凋亡的作用EffectofmiR--139--3poncellproliferationandapoptosisofgastriccancer答辩委员会主席:郑树森院士浙江大学医学院附属第一医院答辩委员会成员:张启瑜教授黄东胜教授王跃东教授张勤教授温州医学院附属第一医院浙江省人民医院浙江大学医学院附属第二医院浙江省人民医院论文答辩日期:2013年5月21日温州医学院硕士学位论文目录111[illllJlgllllLHllilllllUIlll1111Y2397373中文摘要(关键词)⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要(关键词)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3’静—j;j‘...............................··········································‘‘‘‘‘’‘‘b日U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。第一部分miR一139—3p在胃癌组织和癌旁正常组织中表达情况⋯⋯6一材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6二结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10第二部分miR一139—3p抑制剂下调AGS和SGC一

3、7901胃癌细胞株中miR一139—3p的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14一材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14二结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17第三部分miR一139—3p对AGS和SGC一7901胃癌细胞株增殖和凋亡作用的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18一材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18二结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·20分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯23参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯24附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致谢⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·29综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42温州医学院硕士学位论文mi卜139—3p在胃癌组织中的表达及其对细胞增殖和凋亡的作用中文摘要研究背景:胃癌是一种常见的消化道肿瘤,尽管近年来胃癌的发病率有所下降,但在我国胃癌仍是发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一。因此寻找到特异性的诊断标记物和高效的靶向药物,对于

5、改善患者预后和提高患者生存率有深远的意义。近年来研究发现的微小RNA(microRNAs,miR)作为一种非编码的内源性RNA,是由18~23个核苷酸构成的单链非编码RNA分子,通过与靶基因mRNA的3’端非编码区(3’-untranslationalregions,UTRs)结合,降解或抑制mRNA的翻译导致靶基因的转录后沉默,从而参与靶基因功能的调节。miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括早期发育、细胞增殖、分化和凋亡等。进~步研究发现,miRNA的异常表达还与肿瘤的发生发展有着密切关系。因此,以miRNA作为研究切入点,为胃癌的早期诊断和药物靶向治疗开辟了

6、一条新的路径。目的:研究miR-139-3p在配对胃癌组织和癌旁正常组织中的表达水平,探讨miR一139—3p在胃癌组织中的表达与胃癌患者临床病理特征的相关性,观察miR一139-3p对AGS和SGC-7901胃癌细胞株的增殖和凋亡的作用。方法:收集38例新鲜胃癌手术切除标本及癌旁正常组织,利用TRIZOL试剂提取总RNA,利用逆转录试剂盒合成cDNA,采用qRT—PCR法检测各个样本中miR一139—3p的表达情况,并分析miR-139-3p的表达与胃癌临床病理特性之间的关系。取对数生长期AGS和SGC一7901细胞接种于6孔板中(细胞浓度2×105个/:tL)。按转

7、染试剂盒要求,将miR—139—3p抑制剂Anti-hsa—miR一139—3pmiScriptmiRNAInhibitot(miR-139—3pInhibitor)作用于细胞,作为实验组;将miScriptInhibitorNegativeControl作用于细胞,作为对照组。转染24h后,qRT—PCR检测miR-139-3p的表达水平,MTT法检测miR一139—3p对AGS和SGC一7901胃癌细胞株增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:qRT-PCR结果显示:miR一139-3p在胃癌组织中表达高于癌旁正常组织(P

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