存活蛋白和p63蛋白在b细胞非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及其对细胞凋亡和增殖的作用

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1、存活蛋白和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及其对细胞凋亡和增殖的作用【摘要】本研究探讨存活蛋白（Survivin）和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤（BNHL）发生发展中的可能作用及其与细胞凋亡和增殖的相互关系。应用免疫组织化学SP法和TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术检测43例BNHL和10例反应性增殖淋巴组织（RHL）中的survivin和P63蛋白表达以及细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PA）的水平。结果表明：survivin和P63在43例BNHL中表达的阳性率分别为69.8%（30/43）和82.7%（36/43），survivin和P

2、63在10例RHL中表达阳性率分别为10%（1/10）和40%（4/10），survivin在侵袭性BNHL中的阳性率明显高于惰性BNHL（83.3%vs46.2%，P<0.01），P63蛋白表达差异无显著性意义；survivin阳性表达与凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）呈正相关（r=0.429,P<0.01;r=0.348,P<0.01），P63蛋白阳性表达与AI和PI呈正相关（r=0.451,P<0.01;r=0.369,P<0.05），BNHL的AI和PI呈显著正相关（r=0.598,P<0.001）。结论：survivin

3、可能参与了BNHL的凋亡和增殖调控机制，P63作为癌基因参与BNHL发生，二者可能共同影响细胞增殖和凋亡。【关键词】B细胞非霍奇金淋巴瘤survivinP63蛋白细胞凋亡细胞增殖ExpressionofSurvivinandP63ProtEininBCellNonHodgkin′sLymphomaandTheirEffectsonCellApoptosisandProliferationZUOXueLan,ZHOUYing,ZHOUXin1,LIUXiaoHong,ZHANGKeJian,YANGHuaQiang,MENGJuanDepartmentofHem

4、atology,1GeneDetectionCenter,ZhongnanHospital,ALT）7例，弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBL）27例，淋巴结边缘区B细胞淋巴瘤（MZL）1例，浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤（PCM/PCL）1例。惰性BNHL13例（30.2%），侵袭性BNHL30例（69.8%）。免疫组织化学染色及结果判定采用链霉素抗生物素过氧化酶（SP）法超敏试剂盒（福州迈新生物技术有限公司产品）检测survivin、P63、PA的表达。DAB、PBS、枸橼酸盐酸等均购自福州迈新生物技术有限公司；操作按说明书进行，4μm石蜡切片进行免疫组织化学染色。以PBS替代一

5、抗作阴性对照。增殖指数（proliferationindex,PI）的计算：高倍视野下计数1000个肿瘤细胞中PA阳性细胞数所占百分比为PI，对滤泡性NHL只计数滤泡内的肿瘤细胞。survivin阳性表达于细胞浆，P63蛋白阳性表达于细胞核。在高倍镜下选10个具有代表性视野，计算1000个肿瘤细胞中阳性细胞数并换算成百分比。阴性（-）：阳性细胞数<5%；弱阳性（+）：阳性细胞数介于5%-25%；中度阳性（++）：阳性细胞数介于25%-50%；强阳性（+++）：阳性细胞数大于50%。细胞凋亡TUNEL检测采用TUNEL试剂（Roche公司产品）检测凋亡细胞，参照Roch

6、e公司原位末端标记试剂操作手册及BNHL细胞凋亡和增殖的关系43份BNHL标本中的AI中位数为1.62%，PA的阳性率为100%。PI的中位数为43.4%。经Spearman等级相关分析证实两者间呈显著性正相关（r=0.598,P<0.001）。经MamnphomaandRiditanalysisSurvivin、P63的表达与AI、PI的关系经Marnan等级相关分析，survivin的表达与AI和PI呈显著正相关（r=0.429,P<0.01;r=0.348,P<0.01），P63的表达与AI和PI也呈正相关（r=0.451,P<0.01

7、;r=0.369,P<0.05）(表4)。讨论Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitorofapoptosisprotEins,IAP）家族的新成员，1997年耶鲁大学Altieri等用效应蛋白酶受体21（effectorscellproteasereceptor21，EPR21）cDNA在人类基因库的杂交筛选中分离出来［1］，它是一个含142个氨基酸的蛋白，基因定位于人染色体17q25，长度范围75-130kb，分别由不同的mRNA(1.9kb和1.3kb)所编码［2］。研究发现，survivin的