hormad2在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

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1、一;巧,J分类号:R735.2密级:公开W才為、I研究生学位论文H0RMAD2在胃癌中的表达及对胃癌细胞増殖论文题目(中文)和稠亡,,的影响TheExpressionofHORMAD2and化eE化cts论文题目(外文)ofItonProliferationandApoptosisonGas化icCancerCeil研巧生姓名侯向红学科?、专业内科学消化系病研究方向消化道卿瘤学位级别硕±

2、导师姓名、职称乔梁教授论文工作起止年月2014年4月至2015年4月论文提交日期2015年4月论文答辩日期2015年5月学位授予日期2015年6月校址:甘肃省兰州市原创性声明:本人所呈交的学位论文本人郑重声明,是在导师的指导下独立进行研巧所取得的成果、、观点等,。学位论文中凡引用他人己经发表或未发表的成果数据均己明确注明出处。除文中己经注明引用的内容外,不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集

3、体,均已在文中明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:/!養刮如日期:社b,j关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属昔州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定,同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权兰州大学可W将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据J。本人离校后发库进行检索,可ti采用任何复制手段保存和汇编本学位论文一表、

4、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,第署名单位仍然为兰州大学。本学位论文研巧内容:□可W公开□不宜公开,己在学位办公室办理保密申请,解密后适用本授权书。一""(请在W上选项内选择其中项打V)论文作者签名:导师签名:'?W5、(:日期:、日期,、^叶皆H0RNIAD2在胃癌中的表达及对胃癌细胞増殖和调亡的影响中文摘要-目的i1:实验室前期工作己证实m民33b在胃癌组织中下调,且初步验证了H0民MAD2可能是m-i反133b的祀基因。

5、本课题探讨人胃癌组织及胃癌细胞系中H0RMAD2的表达H0RMAD2对正GES-1;研究下调常胃粘膜上皮细胞和胃癌---细胞株SGC7901、AGS、MGC803和BGC823增殖、调tW及细胞周期的影响。方法:实时巧光定量PC民技术检测54对人胃癌组织及癌旁沮织(距离病灶-5cm之外的沮织)中H0RMAD2的表达水平。培养正常胃粘膜上皮细胞GES1SGC-AGS--及胃癌细胞株7901、、MGC803和BGC823,通过实时巧光定量estern-PCR和蛋白质印迹法

6、(wblot)检测正常胃粘膜上皮细胞GES1和分化程度不同的胃癌细胞中H0RMAD2的相对表达水平。然后用针对H0RMAD2合成---的特异性的siRNA对细胞株GES1和MGC803、SGC7901、BGC-823及AGS通过脂质体进行瞬时转染,并使用带有绿色巧光蛋白的siRNA检测脂质体转染细胞的有效性。转染48h和7化后,分别在mRNA和蛋白水平通过实时焚光定PC民MAD2的-量esternblot检测转染后细胞株H0R表达情况8及w。使用CCK

7、-检测下调H0RMAD2对正常胃粘膜上皮细胞GESSG-、1和胃癌细胞株C7901AGS--、MGC803和BGC823增殖能力的影响。通过流式细胞术检测细胞通过SiRNA转染4化后的细胞周期及细胞调亡率。结果;实时芙光定量PC民得到H0RMAD2在胃癌组织中的表达量高于癌旁组织(P<0.05);但H0RMAD2的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度、浸涧深度W及淋己结转移并没有相关性(戶>0.05乂实时癸光定量PCR和western-blot结果表明H0RMAD2在未

8、分化的胃癌细胞株MGC803中的表达水平比正常--胃粘膜上皮细胞GES1和其他分化类型的胃癌细胞株(SGC7901、AGS和--823显増高-BGC)明(户<0.05),而细胞株SGC7901和AGS与GES1相比H0RMAD2的表达水平(户<-降低0.05)。siRNA转染胃癌细胞株和GES1后,与对照组(siRNANC)相比,H0RMAD2在mRNA和蛋白水平的表达明显下调_(<-MAD2表达下调后正常胃粘膜上皮P0.05),转染有效。CCK8检测到HOR细---、-

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