grp78表达下调对肺腺癌细胞耐药的影响

《grp78表达下调对肺腺癌细胞耐药的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、大连医科大学硕士学位论文GRP78表达下调对肺腺癌细胞耐药的影响姓名：姜莉申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：王琪20080601独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位铬≥作者签名：兰茎l签字日期：主!!年—三月』日学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科

2、大学有关保留、使用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。论文作者签名：荽帮指导教师签名：——碑签字日期：赴虹年』月旦日GRP78表达下调对肺腺癌细胞耐药的影响硕士研究生：姜莉指导教师：王琪教授指导小组：王琪教授专业名称：内科学摘要目的：采用RT．PCR、免疫荧光细胞化学等分子生物学技术，检测在Ca2+鏊合剂BAPTA．AM作用下人肺腺癌细胞SPCAl糖调节蛋白78(

3、GRP78)的表达水平，并分析GRP78表达下调对肺腺癌细胞对VP．16耐药的影响。方法：将一定密度、生长状态良好的SPCAl细胞随机分为抑制组(加入BAPTA．AM，浓度为0、1O、20、30、40、501．tM)、诱导组(加入A23187，浓度为2pM)及对照组(加入PBS)。采用RT．PCR、免疫荧光细胞化学方法检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达。再向各组细胞中加入化疗药物VP．16(浓度为309M)，利用流式细胞仪测定细胞生存率。根据GRP78的表达水平与细胞对VP．16的生存率，分析GRP78在肺腺癌细胞对VP．16耐药中的作用。结果：BAP

4、TA．AM可抑制人肺腺癌细胞SPCAlGRP78的表达，且GRP78表达水平与BAPTA．AM具有一定的浓度依赖性。抑制组的荧光强度明显弱与诱导组和对照组。A23187在基因和蛋白水平均能诱导GRP78的表达。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示：抑制组细胞凋亡率高于对照组和诱导组，而诱导组细胞凋亡率最低。结论：本实验研究结果表明：BAPTA．AM能够抑制人肺腺癌细胞SPCAl核酸和蛋白水平GRP78的表达，而A23187能够诱导GRP78表达。GRP78表达程度与VP．16作用下细胞的凋亡率具有相关性，GRP78表达越高，细胞生存率越高。这表明GRP78能够提高SP

5、CAl细胞对VP．16的耐药性，且其耐药性与GRP78表达的程度有关。在基因水平干预GRP78的表达，一方面能够减弱GRP78对肿瘤细胞的保护作用，另一方面能够减低肿瘤细胞对化疗药物的耐药，促进肿瘤细胞的凋亡，提高化疗药物疗效，这一手段可能成为未来治疗肺癌的新办法。关键词：GRP78BAPTA．AM肺癌耐药A23187Down--regulationoftheendoplasmicreticulumchaperoneGRP78／BipbyBAPTA—AMcontributestoattenuatetheprotectiveeffectofGRP78inlungca

6、ncerMasterdegreecandidate：LiJiangSupervisor：Professor：QiWangVice-supervisor：Professor：OiWangMajor：InternalMedicineAbstractObjectives：ToinvestigatetherelationshipbetweentheexpressionofGRP78andresistancetoanti··cancerdrugVP··16invitroinlungadenocarcinomaSPCAlcellline．Methods：BAPTA．AMand

7、A23187wereusedtoinhibitorinducetheexpressionofGRP78．RT—PCRwasusedtodetecttheexpressionofGRP78atgenelevelandimmuno￡1uoreseenceatproteinlevelaftercellstreatedbychemicalsatdifferentconcentrations．CellviabilitywasdetectedbyflowcytometryaftercellsexposedtoVP·16．Results：TheexpressionofGRP78

8、atbot