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时间:2019-05-15
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1、学校代码:10286分类号:R734.2密级:公开UDC:616学号:153888临床医学硕士学位论文Hsa_circ_0044013在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖的影响(学位论文形式:基础研究)研究生姓名:陈燕导师姓名:朱晓莉申请学位类别内科学(专业学位)学位授予单位东南大学专业名称临床医学论文答辩日期2018年5月28日研究方向肺癌学位授予日期2018年6月20日答辩委员会主席宋勇评阅人宋勇、张蔷2018年06月04日硕士毕业论文Hsa_circ_0044013在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖的影响专业名称:内科学研究生姓名:陈燕导师姓名:朱晓莉Expressiono
2、fHsa_circ_0044013inLungAdenocarcinomaanditsRegulationofProliferationinLungAdenocarcinomaCellADissertationSubmittedtoSoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofMedicineBYYanChenSupervisedbyProf.XiaoliZhuCollegeofClinicalMedicineSoutheastUniversityMay2018东南大学学位论文独创性声明本人卢明所M交的学位论文是我个人在导
3、师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。,尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果。与我,也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料—同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。:研究生签名:日期东南大学学位论文使用授权声明(东南大学、国家图丨5馆、《中国学术期刊光盘版)》电子恭、中国科学技术信息研究所忐社有限公司、万方数据电子出版社、北京万方数据股份有限公司有权保留本人所送交学位,可以采用影印论文的复印件和电子文档、缩印或其他复制手段保存论文。本人
4、电子文档的一,允许论文被查阅和借阅内容和纸质论文的内容相致。除在保密期内的保密论文外,可以公布(包括以电子信息形式刊登)论文的全部内容或中、英文摘耍等部分内奔。论文的公布(包括以电子信息形式刊登)授权东南火学研究生院办理。-一。丨84研究生签各导师签名日期:1>中文摘要研究背景:肺癌已成为我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,严重威胁群众的健康和生命。肺腺癌(lungadenocarcinoma,LUAD)是肺癌中较常见的病理类型,临床上新确诊肺癌中约40%-50%为肺腺癌。通过对肿瘤发病机制及基因水平的研究来寻找新的分子标志物、治疗靶点是目前肺癌领域的重要研
5、究方向。环状RNA(circularRNA,circRNA)是一类特殊的内源性非编码RNA,具有稳定、保守、组织及时间特异性等特点,且广泛存在于真核生物中,近年来,随着对circRNA的深入研究,研究者们发现环状RNA在多种肿瘤中存在表达异常,其中一些已被发现可以调控癌基因的表达,影响肿瘤细胞的增殖、凋亡及迁移,与肿瘤的发生发展密切相关。研究目的:明确hsa_circ_0044013在肺腺癌组织中的表达情况,分析其与临床病理资料的相关性;探究hsa_circ_0044013在肺腺癌患者血浆中的表达水平,检验其作为肺腺癌诊断标志物的可能性;通过细胞实验初探hsa_circ_004
6、4013对肺腺癌细胞A549的增殖、周期及凋亡的影响。研究方法:第一部分:采用实时荧光相对定量聚合酶链式反应(quantitativereal-timepolymerasechainreaction,qRT-PCR)技术检测肺腺癌组织和癌旁组织中hsa_circ_0044013的表达水平,并通过患者临床病理资料,进一步分析hsa_circ_0044013与肺腺癌的相关性。第二部分:采用qRT-PCR技术检测肺腺癌患者及健康志愿者血浆中hsa_circ_0044013的表达水平,绘制受试者工作特征曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve,RO
7、C),分析hsa_circ_0044013作为肺腺癌诊断标志物的特异性和敏感性。第三部分:设计hsa_circ_0044013的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)使用脂质体Lipo3000将siRNA转染至肺腺癌细胞A549,qRT-PCR确定I转染效率及对应siRNA浓度。转染24h后进行细胞实验,分为实验组(siRNA转染组)和对照组(si-NC转染组),通过CCK-8、EdU检测转染后肺腺癌细胞增殖能力的变化,通过流式细胞仪技术检测转染后细胞周期和细胞凋
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