pkip表达下调对宫颈癌细胞的影响

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1、摘要目的探讨脂质体法转染Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因对宫颈癌细胞的影响。方法运用脂质体法将含有人RKIP基因的反义质粒asRKIP及空白质粒pcDNA3．1(一)分别转染宫颈癌Caski细胞，采用G418筛选出稳定转染的宫颈癌细胞(转染细胞及对照细胞组)，空白质粒转染后Caski细胞即为空白对照细胞命名为Caski一(一)，asRKIP转染后Caski细胞分为平行的两组分别命名为Caski-asRKIP#1细胞和Caski—asRKIP#2细胞；采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、软琼脂集落形成实验和Transwell小室实

2、验检测RKIP表达下调对宫颈癌细胞的影响。结果成功建立了RKIP表达下调的Caski宫颈癌细胞系；Caski-asRKIP#1和Caski—asRKIP#2细胞的增殖速度比Caski一(一)细胞和Caski细胞快(t=5．32、4．98、6．43、5．34，P0．05)；体外非依赖性生长：Caski-asRKIP#1细胞(239±9．3个)和Caski—asRKIP#2细胞(228±8．9个)与Caski-(一)细胞(73

3、．5±8．7个)和Caski细胞(61．8±7．0个)比较，形成的集落数目多，t=5．46、4．98、5．36、4．89，PO．05，差异无统计学意义；细胞体外侵袭能力：Caski-asRKIP#l组穿过小室的细胞数为(179．6-t-9．7)个，Caski-asRKIP#2组为(180．3±8．9)个，两组比较差异无显著性(t=1．26，P>O．05)；Caski组细胞穿过细胞侵袭小室膜的数目为(72．3±9．6)个，Caski-(一)组

4、数目为(91．2+--8．7)个，两组比较，差异无显著性(t=1．35，P>O．05)；Caski-asRKIP#1组和Caski-asRKIP孝2组与Caski一(一)组、Caski组比较差异有统计学意义(t=5．14、4．98、5．33、4．79，P

5、tObjective：ToinvestigatetheeffectsofRafkinaseinhibitorproteingene(RKIP)transfectionusinglipofectionmethodonthecervicalcarcinomacells．Methods：asRKIPplasmidthatexpressedRKIPmRNAandemptyplasmidpcDNA3．1(-)weretransfectedintoCaskicellsusinglipofectionmethodtoestablishcel

6、llinewithRKIPdown-regulationandcontrolcellline，respectively．ScreeningthestablytransfectedCaskicellsbyG418(thetransfected‘ceilsandthecontrastcells)．emptyplasmidtransfectedcellswerenamedCaski-(一)，asRKIPplasmidtransfectedcellsweredevidedintotwoparrallelgroups，andnamedC

7、aski-asRKIP#1cellandCaski-asRKIP孝2cellrespectively．Methylthiazoletetrazoliumassay,softagarcolonyformationassayandTranswellcellinvasionexperimentswereusedtoexaminetheeffectsofRKIPdown-regulateontheCaskicells，respectively．Results：StablytransfectedCaskicellwithRKIPdown

8、-regulationWassuccessfullyestablished．Caski—asRKIP#1cellandCaski-asRKIP嚣2cellgrowfasterthanCaski-(-)cellandCaskicell(仁5．32、4．98、6．43、5．34，