欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:33236652
大小:7.51 MB
页数:60页
时间:2019-02-22
《鹅tlr2-1、15基因的克隆、组织表达谱分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、广东海洋大学硕士学位论文鹅TLR2--1、15基因的克隆、组织表达谱分析姓名:华国洪申请学位级别:硕士专业:动物遗传育种与繁殖指导教师:贾汝敏;巨向红201206鹅TLR2.1、15基因的克隆、组织表达谱分析摘要Toll样受体(Toll.1ikereceptors,TLRs)是一类重要的模式识别受体(pathogenrecognizereceptors,PRRs),通过识别保守的病原相关分子模式(pathogenassociatedmolecularpatterns,PAMPs)启动先天性免疫应答。Toll样受体不仅参与非特异性免疫(天然免疫),也是连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁。为解析
2、Toll样受体在鹅抗感染免疫中的作用机制,并为抗病育种积累可供选择的基因素材,本研究以马岗鹅为实验对象,采用RT-PCR、SMART-RACE及生物信息学分析技术,克隆了鹅TLR2.1、15全长基因,分析了其分子特征;qRT-PCR技术,定量分析了其在健康鹅体内各组织的表达谱。结果表明:(1)鹅TLR2.1cDNA序列全长3119bp,包括359bp的5’非编码区、378bp的3’非编码区和编码783个氨基酸的2382bp的开放阅读框,分子量为90.17kDa、PI为7.73。TLR2.1全长氨基酸序列包含1个信号肽、9个富含亮氨酸的重复序列(Leucine.richRepeat,LRR)、
3、1个跨膜结构域和1个胞内TIR结构域(IL.R1homologousregion,TIR)。同源比对显示,鹅TLR2.1与其他已报道脊椎动物的TLR2.1具有较高的同源性(39.6.84.6%)。组织表达分析显示,TLR2在健康鹅的组织中具有较广的表达分布,其中在肾脏、法氏囊、皮肤、脑组织中表达量较高。(2)鹅TLRl5cDNA序列全长2805bp,包括114bp的5’非编码区、93bp的3’非编码区和编码865个氨基酸的2598bp的开放阅读框,分子量为98.85kDa、PI为7.25。TLRl5全长氨基酸序列包含1个信号肽、64"富含亮氨酸的重复序列、1个跨膜结构域和1个胞内TIR结构域
4、。氨基酸结构分析、多序列比对和进化树分析都表明,TLRl5与其他物种TLRs之间有较高的氨基酸相似性,与鸡TLRl5的同源性最高(83%)。组织表达分析显示,TLRl5在健康鹅的组织中具有较广的表达分布,其中在肌胃和肌肉组织中表达量较高。关键词:鹅,Toll样受体,基因克隆,基因表达,免疫MolecularCloningandTisssuesExpressionProfileofgooseTLR2--1and15GeneAbstractToll—likereceptors(TLRs)areconsidered硒keysensorstotriggerthehost’Sinnateimmunes
5、ystemandadaptiveilTlrtluneresponsesbyrecognizingvariousPAMPsandinitiatingsignaltransduetion.TLRshaveacentralroleininnateimmunityandarealsorequiredforthedevelopmentofanadaptiveirflmuneresponse,bridginginnateandadaptiveimmunity.ThepresentstudywasconductedtoexplorethepotentialroleofTolllikereceptoront
6、hegooseimmunity,andaccumulatealternativegeneticmaterialforthegoosebreedingfordisease-resistant.WeclonedthecDNAofTLR2-1and15byRT-PCR,SMART-RACEinMaGanggoose,aswelltheirexpressionprofileindifferenttissuesbyqRT-PCR.Theresultsshowedthat:(1)TheclonedgooseTLR2-lfulllengtheDNAexhibited3119bpinlength,inclu
7、dinga5'-terminal(UTR)of359bp,a3'-terminalfOTR)of378bpandanopenreadingframe(ORF)of2382bpencoding793aminoacideshasacalculatedmolecularmassof90.17kDa,atheoreticalpIof7.73,andaputativesignalsecretionpeptide33勰i
此文档下载收益归作者所有