鹅gnih及其受体基因的克隆、组织表达以及在颗粒细胞中的研究

《鹅gnih及其受体基因的克隆、组织表达以及在颗粒细胞中的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据SichuanAgriculturalUniversityMasterDegreeDissertationCloningofgooseGnIHanditsreceptor,thegeneexpressionandresearchingranulosacellsByGanChaoDirectedbyProf．LiLiang&Prof．WangJiwenAnimalGenetics，BreedingandReproductionMolecularGeneticsandWaterfowlBreedingCollegeofAnimalSciencea

2、ndTechnology,SichuanAgriculturalUniversityYa’an，SichuanProvince，ChinaJune，2014万方数据论文指导小组成员韩春春副研究员刘贺贺副研究员f删趔删舢舢舢舢删棚舢JO120861”本论文由国家水禽产业技术体系(课题编号：CARS一43—6)、I四)il省畜禽育种攻关项目(课题编号：2011NZ0099—8)和I四)il教育厅创新团队项目(项目编号：13TD0034)资助本试验在四川农业大学“畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室"完成万方数据论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学

3、位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：者Z互砂刀驴年石月『／日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。

4、同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。口本论文不保密。口本论文保密，在年解密后适用本授权。(请在以上口内划“√”)研究生签名：魄锄签名：孝历沙，，芦年‘月f7日洳7V年厂月f7日万方数据摘要促性腺激素抑制激素(GnlH)能以剂量依赖的模式作用于垂体前叶减少促性腺激素的释放，是目前发现的唯一能抑制生殖系统发育和功能的神经肽。GnlH能从下丘脑、垂体和性腺三个方面同时对繁殖进行调节。除了繁殖方面，它还在压力反射、摄食调节和季节性繁殖等多个方面起着重要的调节作用。为了研究GnIH对鹅繁殖的影响，本试验检测了GnlH及

5、其两个受体RFRPR和NPFFR在产蛋高峰期母鹅不同组织中的表达，并以鹅卵巢颗粒细胞为研究模型，通过添加不同浓度的外源GnlH处理，分析了GnlH对鹅卵巢颗粒细胞功能的影响。主要研究结果如下：(1)获得了GnlH前体mRNA、RFRPR、NPFFR的编码区部分CDS区序列。通过序列分析和氨基酸比对，发现RFRPR与MD职尺之间碱基序列的同源性为65．35％，并且都具有7个相似的氨基酸跨膜结构域。(2)分析了GnIH前体mRNA在产蛋高峰期母鹅不同组织的表达模式。发现GnlH在下丘脑中的表达最高，除了脑部外，在肾上腺、输卵管和卵巢中也有表达，说明GnI

6、H主要的合成场所是下丘脑。(3)RFRPR和NPFFR主要在脑部表达。RFRPR更符合GnIH免疫神经纤维的分布，推测RF即R是鹅GnlH的主要受体。R职PR在肾上腺和眼球中的表达，表明GnlH参与了压力反射和季节性繁殖调控。R职瞅在卵巢中也有表达，表明GnIH能直接调控卵巢的功能。(4)以体外培养的鹅卵泡颗粒细胞为研究模型，通过在培养基中人为地添加外源GnlH(0、0．1、10、1000ng／m1)处理细胞，结果表明GnlH能影响颗粒细胞类固醇激素的合成与分泌。外源的GnlH能降低颗粒细胞中StAR、3口一HSD和CYPl9基因的表达，也能减少雌二

7、醇和孕酮的分泌。(5)外源GnlH能够降低颗粒细胞的活性，促进细胞的凋亡而减少细胞的增殖，降低细胞中C例D，、CCND2和Bcl一2基因的表达。(6)在GnlH处理的细胞中，GnIH能下调LH-R和FSH-R的表达，但对GnRH和显瞅尸R的表达影响却并不显著，表明GnlH对颗粒细胞的调控可能是通过LH-R和FSH-R来实现的。关键词：鹅；GnIH；颗粒细胞；繁殖调控万方数据CloningofgooseGnIHanditsreceptor,thegeneexpressionandresearchingranulosacellsByGanChao(Ani

8、malGenetics，Breeding&Reproduction)DirectedbyProf．LiLia