鹅oaz基因克隆、表达及其在卵泡颗粒细胞中的作用研究

鹅oaz基因克隆、表达及其在卵泡颗粒细胞中的作用研究

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1、分类号;S835.乂学号:S20123109、-y、四川农化大学t硕±学位论义^觀(MZ基因克隆、表达及其在卵泡颗粒细胞中的作用研究.V.—_何巧''-'n,■?-:指导教师康波劃教授学科专业动物遗传育种与巧殖...y。;■.、-?气、?心、、研巧方向分子遗传与氷舍育种A,V'-^f’乂巧?.、?—'\,心咕—.?识、:‘'.v'主1?t?-:2015年06月.

2、I-'?V、-?—4心‘"SichuanAriculturalUniversitgyMasterDereeDissertationgMolecularcharacterizationandexressionpprofilesofanditsfunctionsinfolliculargranulosecellsofSichuanwhiteoosegtBHuiHeyAnimalGenetics,BreedingandReproducti

3、onMolecularGeneticsandWaterfowlBreeding’YaanSichuanProvinceChina,,June,2015论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研巧王作所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加W标注和致谢的地方外,学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研巧成果,也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢

4、意。研巧生签名;>狂年<月片日关于论文使用授奴的声明、;本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定,即学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借闽,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可W用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。□本论文不保密。□本论文保密,在解密后适用本授权。__年""(请在W上□内划V)巧巧旺研究生签名:;^年^月(互曰広《导师签名:户年月侣日摘要鸟氨酸脱簇酶抗酶

5、(ornithinedecarboxlaseantizmesOAZs)是多胺代谢过程yy,中的关键调控酶,能抑制多胺的生成,维持多胺的稳态。研究发现多胺合成受到抑制时小鼠卵巢出现萎缩,卵泡生长停滞甚至闭锁。04封在产蛋期巧黯卵巢组织中,提示可能通过调控卵巢组织中多胺浓度的表达量显著高于产蛋前期,进而参与调控好魏的繁殖。然而,关于OAZs在卵泡发育过程中的作用研究还未见报道,其机制尚不清楚(Zi4Z2,。因此,本研究克隆了化和(X的全长编码区序列定量检测了04ZJ和在四川白蜡组织及不同等级卵泡组织中的表达

6、量,并通过定点突变技术缺失了基因的+1移码位点T碱基,构建突变型614Z7基因的表达载体pE邸P/N--rrmtation至原代培养的四川白蜡颗粒细胞中lOAZl,转染,研究过表达04Z/对鷄卵泡颗粒细胞的影响。(ZJ(Z2652结果表明:四川白籍化和化的全长编码区长度分别为bp和574bp,其+1移码位点分别位于第175位和第97位T碱基。和(04Z2基因的表达具有姐织特异性,(MZi和(24。在下丘脑、垂体和卵巢中的表达趋势相同,都在垂体,在卵巢中的表达量最低中的表达量最高,除胸肌和腿肌外其余各组

7、织中表4幻F51达均占优势。卵泡组织中,0表达量在级卵泡中表达量最低,在F和POF^<卵泡中表达量最高(i0.05),在等级前卵泡和等级卵泡中的表达量均呈递增趋势。04Z2在SWF和F2级卵泡中的表达量显著嵩于卵巢基质,其余各组织中忍>P--的表达量均无显著差异(巧0.05)。将转染pEGF/NlOAZlm山ation至鹤卵泡颗粒细胞48h后,04Z;表达量显著升高,是对照组(转染阳GFP/N1组)的2.60倍(fO.Ol)。随着(242/基因表达量的上调,多胺代谢基因^^说、仿^口、0OC、及571似的

8、表达量显著升高(P<0.05),分别是对照组的1.62倍、1.47-倍、18.51.60X、2、.%倍、1.5倍、10倍和倍细胞增殖、调亡关键调控基因公O化/;-<C/扣公7和的表达量显著升高(P0.05)1.Q

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