松墨天牛普通气味受体的基因克隆、组织表达和功能研究

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1、分类号：R969.48单位代码：10343学号：151004757硕士学位论文论文题目:松墨天牛普通气味受体的基因克隆、组织表达和功能研究研究生姓名：黎策学科专业：生物学类型：学术型指导教师：杜永均二O一八年五月温州医科大学硕士学位论文论文题目:松墨天牛普通气味受体的基因克隆、组织表达和功能研究答辩委员会主席：___江陆斌___研究员中国科学院答辩委员会成员：___张青锋___教授____同济大学___梁韶晖__教授___温州医科大学论文答辩日期：2018年5月26日温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要................

2、.................................1Abstract.................................................4前言.....................................................8第一部分松墨天牛OR基因的克隆与序列分析...............101.1材料与方法.......................................101.2结果...............................

3、..............161.3讨论.............................................32第二部分松墨天牛OR基因的组织与发育表达谱..............352.1材料与方法.......................................352.2结果与分析.......................................372.3讨论.............................................50第三部分松墨天牛MaltOR1

4、5、MaltOR45和MaltORCO的克隆与功能研究....................................................513.1材料与方法.......................................513.2结果.............................................603.3讨论.............................................68全文总结................................

5、................69参考文献................................................72附录....................................................75致谢....................................................77温州医科大学硕士学位论文综述及参考文献..........................................78学位论文独创性声明..............

6、........................88温州医科大学硕士学位论文松墨天牛普通气味受体的基因克隆、组织表达和功能研究中文摘要【目的】1．通过对MaltOR14、MaltOR15、MaltOR17、MaltOR19、MaltOR45和MaltORCO的序列分析，构建进化树，为后续解析以上6种气味受体膜蛋白基因的功能特性提供基础。2．RT-qPCR检测OR在松墨天牛蛹和成虫期不同组织的表达水平，得到组织表达谱用于推断OR基因在松墨天牛生命周期中发挥的功能。3．对MaltOR15和MaltOR45基因构建爪蟾表达载体，利用爪蟾卵进

7、行MaltOR15/MaltORco和MaltOR45/MaltORco的表达，结合双电极电压钳技术，研究气味受体蛋白在松墨天牛生命周期中发挥的功能。【方法】1．松墨天牛MaltOR14、MaltOR15、MaltOR17、MaltOR19、MaltOR45和MaltORCO基因的序列分析利用前期转录组测序得到的基因序列片段，根据片段利用软件primer5.0设计MaltOR14、MaltOR15、MaltOR17、MaltOR19、MaltOR45和MaltORCO的ORF区域引物，进一步通过相应分子生物学技术获得6个目的基因的全长

8、，利用软件Lasergene对MaltOR14、MaltOR15、MaltOR17、MaltOR19、MaltOR45和MaltORCO基因编码的氨基酸序列进行预测，并利用软件Clustal对得到的氨基酸序列进行比对，使