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《中华大蟾蜍蟾酥中蟾毒内酯类化学成分探究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、中华大蟾蛛蟾酥中蟾毒内酯类化学成分探究［摘要］采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱、制备型高效液相等方法从蟾酥的二氯甲烷萃取部位中分离得到12个蟾毒内酯类化合物，根据化合物的理化性质和波谱数据分别鉴定为脂蟾毒配基（1）、蟾蛛它灵（2）、去乙酰华蟾蛛精（3）、19-氧去乙酰华蟾蛛它灵（4）、华蟾蛛它灵（5）、13基蟾蛛灵（6）、12a-密基蟾蛛灵（7）、蟾赊它里灵（8）、嚏根草配基（9）、远华蟾蛛精（10）、嚏根草醇（11）及华蟾赊精-3-辛二酰甲酯（12）。化合物7和12为首次从蟾酥中分离得到，且为新天然产物。［关键
2、词］中华大蟾蛛；蟾酥；蟾毒内酯；化学成分［收稿日期］2013-10-28［基金项目］国家自然科学基金项目（81102518）［通信作者］*田海妍，副研究员，研究方向为中药及天然药物有效成分研究，Tel:（020）38375205,E-mail：tianhaiyanl982@163・com［作者简介］张鹏伟，硕士研究生，Tel:（020）85221016,E-mail：pengwei・zhang@yahoo.com蟾酥VenenuniBufonis为中华大蟾蛛BufobufogargarizansCantor或黑眶蟾蛛B.
3、melanostictusSchneider的耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液经加工干燥而成，具有解毒、止痛、开窍醒神之功效[1]。现代药理学研究表明蟾蛛内酯类化合物是中药蟾酥的主要活性成分。蟾酥总提物及其单体化合物均显示了明显的抗肿瘤活性[2-3]o由蟾皮制成的华蟾素注射液在临床上广泛用于肿瘤的治疗[4-5]o近年来，蟾酥中强心笛类化合物引起人们的广泛关注，除了具有显著强心活性外，还显示了很强的抗肿瘤活性,部分该类化合物具有较好的新药开发前景[6-8]o因此，对于中药蟾酥中蟾毒内酯类化学成分进行研究有重要的意义。本研究对蟾
4、酥的二氯甲烷萃取部位进行了系统化学成分研究，从中分离得到了12个强心笛类化合物，利用1H,13C-NMR以及与文献数据对比等手段，鉴定了这些化合物的结构，分别为脂蟾毒配基（1）、蟾蛛它灵（2）、去乙酰华蟾蛛精（3）、19-氧去乙酰华蟾蛛它灵（4）、华蟾蛛它灵（5）、1B-释基蟾蛛灵（6）、12a-B基蟾蛛灵（7）、蟾蛛它里灵（8）、嚏根草配基（9）、远华蟾蛛精（10）、嚏根草醇（11）及华蟾蛛精-3-辛二酰甲酯（12）。其中化合物7和12为首次从蟾酥中分离得到，且为新天然产物（图1）。1材料北京泰克仪器公司X-5型显微熔
5、点测定仪（温度计未校正）测定；日本JASCOP-1020型旋光仪测定；BrukerAV-400型超导核磁共振仪；FininganLCQAdvantageMAX质谱仪，Agilent1200分析型高效液相色谱仪，伍丰LC-100液相色谱仪，UltimateXB-C18（4.6mmX250mm,5um,WelchMaterials）分析柱，Cosmos订ODS（4.6mmX250mm,日本NacalaiTesqueInc）制备柱，SephadexLH-20凝胶（Pharmacia公司），柱色谱用硅胶（青岛海洋化工），薄层硅胶
6、板（烟台化学工业研究所），RP-18F254薄层预制板和ODSRP-18柱色谱材料（Merck公司），所用试剂均为分析纯和色谱纯。实验用药材蟾酥于2008年8月自江苏宝应蟾蛛养殖基地采集。经暨南大学周光雄教授鉴定为中华大蟾蛛B.bufogargarizans的蟾酥。标本（No.2008082001）保存暨南大学中药及天然药物研究所。2提取与分离蟾酥药材1.5kg粉碎成粗粉，10倍量95%乙醇超声提取3次，每次45min（40°C,100%功率），合并提取液，过滤，减压浓缩得浸膏约900g,混悬于20%乙醇中，CH2C12
7、萃取3次，合并萃取液，减压浓缩得二氯甲烷的萃取部分321goTLC薄层及HPLC分析，显示CH2C12萃取部分主要为蟾毒内酯类化合物。取二氯甲烷的萃取部分150g,经硅胶柱色谱（100〜200目），环己烷丙酮梯度洗脱（1：0,5:1,3:1,1:1,0:1）,共得到15个流分（Fr.1〜Fu15）。图1化合物1〜12的结构Fig.1Chemicalstructuresofcompounds1-12Fr.4经RPHPLC(60%甲醇)分离得化合物1(77.2mg)；Fr.5经硅胶柱色谱(200〜300目)，环己烷丙酮梯度洗
8、脱得5个流分(Fr.5.1〜Fr.5.5),Fr.5.4经RPHPLC(70%甲醇)制备得化合物3(94.6mg)；Fr.6重结晶得5(3.8g),母液经硅胶柱色谱(200〜300目)，氯仿甲醇梯度洗脱得化合物2(94.6mg)和12(5.0mg)；Fr.9经硅胶柱色谱(200〜300目)，氯仿甲醇梯度洗脱得6个流分
