灯盏花对体外培养人牙龈成纤维细胞增殖的影响

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1、灯盏花对体外培养人牙龈成纤维细胞增殖的影响罗启贤1,2刘K:庚1,2(通讯作者)莫业跃1,2尹高权1,2(1广州医学院附属广佛医院510108；2佛山市南海区第二人民医院528251)【中图分类号】R78【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)18-0051-03【摘要】目的体外评价中草药灯盏花对正常人体牙龈成纤维细胞增殖和量效关系的影响。方法分离、培养正常人体牙龈成纤维细胞。将浓度为45、90、135、180、225、270、315、360mg/L的灯盏花注射液分别作用于第5代正常人体牙龈成纤维细胞，采用四唑盐比色试验(MTT试验)，检测细胞的增殖，并测

2、出各组的光吸度值(OD值)。结果与对照组OD值相比，各灯盏花组随浓度升高其OD值依次下降，且有统计学差异(P<0.05)。结论中草药灯盏花对体外培养的人牙龈成纤维细胞有抑制作用，提示灯盏花有防止牙龈纤维化的作用。【关键词】灯盏花牙龈成纤维细胞细胞增殖【Abstract】Objective：Tostudytheeffectionoferigeronbreviscapus(EB)onproliferationofhumangingivalfibroblastinvitro.Methods:Humangingivalfibroblastwasisolatedandprima

3、rilyculturedinvitro.The5thpassageoffibroblastwereplantedina96-wellcultureplate.Theyweredividedinto9groups.AccordingtoEBconcentration,Omg/LEBgroup(controlgroup)、45mg/LEBgroup、90mg/LEBgroup、135mg/LEBgroup、180mg/LEBgroup、225mg/LEBgroup、270mg/LEBgroup、315mg/LEBgroupand360mg/LEBgroup.Whenallgro

4、upsbeinginexponentialphaseofgrowthundermicroscope,theyweredyedbyMTTmethodandOD(opticaldensity)valueofeverywellwasdetectedbyenzymelinkedimmunodetectionmeter.Results:BycontrasttoODmeanofcontrolgroup,from45mg/LEBgroupto360mg/LEBgroup,ODmeanofeverygroupdecreasedstepbystep.Conclusions:Withsomer

5、angeofitsconcertration,EBcouldinhibittheproliferationofosteoblastinvitro,thustohintthaterigeronbreviscapuscanpreventthefibrosisofgingival.【Keywords】erigeronbreviscapusgingivalfibroblastproliferation灯盏花，又名灯盏细辛，为一种活血化瘀类中草药。国内有学者研究发现局部应用灯盏花可通过促进牙周膜和牙槽骨的改建及其中一些细胞因子的表达，从而加速正畸牙移动［1-4】，但局部应用灯盏花是否

6、会引起人体牙龈的变化,0前国内外尚无报道。本实验采用体外细胞培养的方法，评价不冋浓度灯盏花对正常人体牙龈成纤维细胞增殖的影响。1材料和方法1.1人牙龈成纤维细胞的分离和培养正常人体牙龈组织块取自中南大学湘雅二医院口腔中心牙周科1例20岁无全身系统性疾病和局部牙周病且无吸烟饮洒史的男性患者，经患者知情冋意后，从需作牙冠延长术的左侧上颂侧切牙牙龈处切取正常健康牙龈组织，组织块用含抗生素的PBS液漂洗并修剪成小块，用disperse酶（美国Gibco公司产）消化过液，撕去上皮层，置0.1%胶原酶（上海生物有限公司产）消化4〜6h，1000r离心lOmin，加入DMEM培养基（美国

7、Gibco公司产，含10万μ/L青霉素、100mg/L链霉素、10%小牛血清）中，置5%CO2培养箱中37°C培养，每3d更换培养基，5d传代一次，直至第5代。1.2不同浓度灯盏花干预不同吋间的MTT试验取上述培养的第5代人牙龈成纤维细胞，用0.25%胰酶消化后，按细胞数为4×104/孔的细胞密度接种到96孔培养板中，共分9组，每组10孔。细胞贴壁生长后，每板每组各孔培养基中分别加入0、45、90、135、180、225、270、315、360mg/L的灯盏花注射液（云南生物谷灯盏花药业有限公司产