spehplc法测定苦丁茶老叶中熊果酸的含量

《spehplc法测定苦丁茶老叶中熊果酸的含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SPEHPLC法测定苦丁茶老叶中熊果酸的含量：路玫，李徽，蒙大平，荣延平【摘要】目的建立苦丁茶老叶中熊果酸含量的测定方法。方法采用SPEHPLC法，以1mLOASISRHLBCartridge固相萃取小柱对样品进行提取分离；色谱柱为NovaPakC18柱(3.9mm×150mm，4μm)；以甲醇水磷酸（体积比85∶15∶0.1）为流动相，流速为0.8mL·min－1，检测波长为220nm，柱温：30℃。结果测定组分熊果酸与其他组分的色谱峰达到基线分离；熊果酸平均加样回收率为98.25%，RSD＝0.64%。结论本方法可有

2、效减少杂质干扰，结果准确可靠,并且有利于色谱柱的保护。【关键词】苦丁茶；SPEHPLC法；熊果酸；含量测定　　Abstract:ObjectiveToestablishamethodfordetectingthecontentofursolicacidintheoldleavesofIlexKudingchabySPEHPLC.MethodsUrsolicacidextractedfromtheleavesm×150mm，4μm）columnusingmethanolH2Ophosphate(85∶15∶0.1)asmob

3、ilephase.ThefloL·min-1anddetection.ResultsUrsolicacidcouldbeseparatedethodissimpleandaccurate.　　KeyLOASISRHLBCartridge固相萃取小柱（m×150mm,4.0μm)；流动相为甲醇水磷酸（体积比85∶15∶0.1）；检测波长：220nm；流速：0.8mL·min-1；柱温：30℃。在此色谱条件下，熊果酸的保留时间约为13min。　　2.2系统适应性试验分别取熊果酸对照品溶液及样品溶液，在上述色谱条件下各进样10μL,

4、结果，样品溶液与对照品溶液在相同的保留时间有相似的色谱峰，而且熊果酸与其他成分能够较好地分离,按熊果酸计算理论塔板数不低于3000，拖尾因子1.02,分离度大于1.5,保留时间约为13min，结果见图1。　　2.3标准曲线的制备精密称取熊果酸对照品8.34mg，置10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为0.834mg·ml-1的对照品溶液。分别取该对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、4.0mLA.熊果酸对照品；B.苦丁茶样品　　图1高效液相色谱图　略　　置10mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条

5、件，分别进样10μL，以熊果酸的进样量(m)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标绘制标准曲线，结果回归方程为：A＝220215m-7590.60(r＝0.9999)，表明熊果酸的进样量在0.417-3.336μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。　　2.4精密度和稳定性试验精密吸取熊果酸对照品溶液10μL，在上述色谱条件下重复进样5次，测定峰面积，结果其峰面积的RSD＝1.34％（n＝5）。精密吸取新配制的样品溶液10μL，每隔1h进样测定1次，连续测定5次，结果测得峰面积的RSD＝1.82％（n＝5），说明样品溶液在5h内稳定性良好。　

6、　2.5重复性试验对同一批样品（批号：041015），分别取5份，每份约10g，按“2.7”项下操作，结果测得样品中熊果酸的平均含量为160.82μg·g-1，RSD＝1.28%（n＝5），表明本方法的重复性良好。　　2.6回收率试验取已测知含量的样品(批号041015)5份，每份约10g，分别精密加入0.834mg·mL-1的对照品溶液2.0mL，按“2.7”项下操作，在上述色谱条件下进样10μL，按样品含量测定方法测定，计算平均回收率，结果见表1。　　表2样品中熊果酸含量测定结果　略　　3讨论　　3.1文献报道苦丁茶老叶所含槲

7、皮素含量低于成品茶或嫩叶，而山萘素含量却是老叶高于嫩叶［2］。笔者试验测得苦丁茶老叶中熊果酸的含量约为嫩叶中的2倍(另文发表),这些提示了如选用老叶作为从苦丁茶中提取熊果酸的原料，产率将比嫩叶高，苦丁茶老叶仍不失其药用价值。　　3.2不同部位的苦丁茶叶中熊果酸的含量存在着一定差异。本文采用固相萃取高效液相色谱法测定苦丁茶老叶中熊果酸的含量,所建立的方法能较好地消除杂质的干扰，结果准确度较高。　　3.3由于熊果酸不溶于水，在洗脱液甲醇比例研究中,发现10%～35%（体积分数）的甲醇无法将熊果酸洗脱下来,而80%（体积分数）甲醇可以

8、将熊果酸完全洗脱,且用量少,所以采用80%（体积分数）甲醇进行洗脱收集。　　3.4本法简便、灵敏、准确性、重复性良好,可作为苦丁茶老叶中熊果酸含量测定的方法。【