hplc法测定裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量

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1、HPLC法测定裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量作者：张艳秋，洪金波，刘文林【摘要】目的：建立裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量测定方法，考察海南五指山地区野生裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量。方法：采用高效液相色谱法测定裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量，乙腈-甲醇-3.5%乙酸胺水溶液(69∶10∶21)为流动相；流速为1mL/min，检测波长为215nm。结果：齐墩果酸与熊果酸的线性范围分别为1.63～6.53μg(r=0.9996)与1.20～7.20μg(r=0.9997)，回收率分别为98.11%和101.64%。结论：本法操作简单，测

2、定结果准确，适于裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量测定。【关键词】裸花紫珠；齐墩果酸；熊果酸；高效液相色谱法［ABSTRACT］Objective:Toestablishamethodforqualitycontrolofoleanolicacidandursolicacidinfoliumcallicarpaenudiflorae,whichisoriginallygrewinthefivefingermountainarea.Methods:Thecontentofoleanolicacidandursolicacidinfoliumca

3、llicarpaenudifloraeweredeterminedbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC).TheanalyticalcolumnwasC18(250mm×4.6mm,5μm).Themobilephaseconsisted8ofacetonitrilemethanol3.5%ammoniumacetate(69∶10∶21),theflowratewas1.0mL/min.TheUVdetectionwavelenghthwas215nm.Results:Oleanolica

4、cidandursolicacidshowedagoodlinearityinrangeof1.63～6.53μg(r=0.9996)and1.2～7.2μg(r=0.9997).Theaveragerecoverywas98.11%,101.64%,respectively.Conclusion:Themethodisasimple,convenient,accurateandrelable，anditcanbeusedtoqualitycontroloffoliumcallicarpaenudiflorae.［KEYWORDS］Foliu

5、mcallicarpaenudiflorae;Oleanolicacid；Ursolicacid;Highperformanceliquidchromatography(HPLC)裸花紫珠药材为马鞭草科植物裸花紫珠（CallicarpanudifloreaHook.EtArn.）的干燥叶，具有消炎、解毒、收敛、止血作用，用于治疗化脓性炎症、急性传染性肝炎、外治烧伤、烫伤、外伤出血等，是海南黎族民间常用的一味药材。8在海南黎族民间验方基础上，经现代研究发展而成的裸花紫珠片与复方木麻黄片，就是以裸花紫珠为主药的成方制剂，前者用于治疗胃出血及病毒性

6、肝炎，后者用于治疗寒湿痢疾。裸花紫珠药材主产海南五指山地区，由于裸花紫珠药材化学研究较少，化学成分不明确，其含量测定指标难以建立，给药材质量控制带来困难。最新研究文献报道，从裸花紫珠中分离出了具有抗菌消炎作用的齐墩果酸、熊果酸以及黄酮类成分［1］，我们经对其进行薄层色谱及高效液相色谱（HPLC）分离检测发现，裸花紫珠中所含齐墩果酸与熊果酸含量很高，以两者作为含量测定指标对裸花紫珠药材进行质量控制具有实际意义。本实验系用HPLC法对裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸含量进行了测定，为进一步进行新制剂开发和质量控制提供科学依据。1仪器、试剂与样品Wate

7、rs高效液相色谱仪（Delta600泵，2487检测器）；Milennium色谱工作站；齐墩果酸与熊果酸化学对照品购自中国药品生物制品检定所；裸花紫珠药材采自海南省五指山区，由本所鉴定；乙腈、甲醇为色谱纯，其它均为分析纯试剂。水为自制纯化水。2试验方法与结果2.1色谱条件与系统适用性色谱柱：LichrospherC18(250mm×4.6mm,5μm)，流动相：乙腈-甲醇-3.5%乙酸胺水溶液(69∶10∶21)，流速为1mL/min，检测波长为215nm，柱温30℃，进样量20μ8L。在此条件下，取裸花紫珠供试品溶液、齐墩果酸与熊果酸对照品

8、溶液分别进样，所得色谱图见图1A、B，齐墩果酸与熊果酸能有效分离。a.齐墩果酸(Oleanolicacid）b.熊果酸（Ursolicacid）图1齐墩果酸与熊果酸