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1、HPLC法测定陕西女贞子中齐墩果酸与熊果酸的含量【摘要】目的测定陕西境内不同产地、不同生长期女贞子中齐墩果酸与熊果酸的含量。方法采收陕西境内关中3市(渭南、西安、宝鸡)与陕南2市(安康、汉中)10月产女贞子；并采收西安8、9、10、11和12月产女贞子,去杂质阴干,室温密闭贮藏。采用HPLC法,LichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,L/min。建立标准工作曲线,检测各地、各时间点样品中齐墩果酸和熊果酸含量。结果安康产女贞子中齐墩果酸与熊果酸含量均达到同期最高。不同生长
2、期女贞子在10月份出现齐墩果酸含量最高值；而熊果酸在幼果中(8月)含量最高并随生长期延长逐渐下降。到12月时二者含量均降至最低。结论女贞子在不同产地、不同生长期齐墩果酸和熊果酸的含量是不同的,故在实际应用时应根据不同需要适时采收。【关键词】女贞子；陕西；齐墩果酸；熊果酸；高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTodetermineoleanolicacid(OA)andursolicacid(UA)fromFructusLigustriLucidiindiffrernthabitatan
3、dvariousgrober,October,NovemberandDecemberinXi’an.Removedimpuritiesandstoragedthefruitsunderroomtemperature.ByHPLCatographicsystem,andLichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm)columnobilephase,thefloL/min.ThestandardadetodeterminethecontentsofOAandUAatdifferentha
4、bitatanddifferenttimespotfromsamples.ResultThecontentsofOAandUAber.ConclusionThecontentsofOAandUAchangedindifferenthabitatanddiffrerntgroainlybaseonthehighestcontentstoselecttheharvesttimeaccordingtoourdemands.KeylucidumAit.)的果实,在我国药材资源丰富,具有滋补肝肾、明目乌发之功
5、效[1]。女贞子中含有齐墩果酸、熊果酸、甘露醇、多糖及微量元素等多种成分,已见的报道中齐墩果酸与熊果酸是其发挥药理作用的主要有效成分。这两种成分的含量与女贞子的生长空间、时间的变化密切相关。本实验测定陕西境内不同地点、不同生长期女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量,对于指导该药的采收时间及合理应用具有实际意义。1临床资料polucidumAit.)的果实。2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱LichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm,江苏汉邦公司)；流动相：乙腈-甲醇-水-磷酸-三乙胺(
6、50∶30∶20∶0.02∶0.04)；流速：1mL/min；检测波长：205nm；柱温：室温；进样量：20μL。 2.2对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸与熊果酸对照品12.68、5.12mg,分别置25mL容量瓶中,加甲醇制成每1mL分别含0.5072mg齐墩果酸与0.2048mg熊果酸的混合溶液,摇匀,即得对照品贮备液,备用。 2.3供试品溶液的制备精密称取过65目筛的女贞子干燥粉末0.2g,加甲醇50mL,称重,超声处理30min,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,经0.
7、45μm微孔滤膜过滤,即得供试品溶液。 2.4线性关系考察精密吸取2.2项下对照品贮备液1、2、3、4、5mL,分别置于10mL容量瓶中,甲醇定容,摇匀,得5个不同浓度的混合对照品溶液。分别精密吸取20μL,按上述色谱条件进样分析。以浓度X(μg/mL)为横坐标、峰面积Y为纵坐标绘制标准曲线并计算回归方程。回归方程为：齐墩果酸Y=12373.29X+108249.93,r=0.9996；熊果酸Y=12098.02X+85955.73,r=0.9998。结果表明：齐墩果酸在50.72～253.6μg
8、、熊果酸在20.48～102.4μg呈良好的线性关系。 2.5精密度试验精密吸取同一混合对照品溶液20μL,按上述色谱条件,重复进样5次,测得齐墩果酸、熊果酸峰面积的RSD分别为1.3%、2.2%。 2.6稳定性试验取同一供试品,按供试品溶液的制备方法操作,分别于0、1、2、4、8h精密吸取20μL进样,测得齐墩果酸、熊果酸峰面积的RSD分别为1.7%、2.3%。结果表明,供试品溶液在8h内稳定性较好。 2.7重复性试验精密称取同一样品10月样(№3)5份,按供
