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1、大鼠肾虚型颈椎病模型的建立【摘要】采用病、证模型复合的方法建立大鼠肾亏型颈椎病动物模型。方法:选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、颈椎病模型组和肾虚型颈椎病模型组,每组10只。采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合去卵巢肾虚亏模型的方法建立肾虚型颈椎病模型。通过检测大鼠子宫及附件形态和质量、血清雌二醇(estradiol,E2)含量验证肾虚证;通过颈椎间盘组织病理学、Ⅱ型和Ⅹ型胶原的免疫组化检测及聚集蛋白聚糖(aggrecan1,Agc1)、Ⅱ型前胶原基因(typeⅡprocollagengene,Col2a1)
2、、基质金属蛋白酶13(matrixmetalloprotEinase13,MMP13)和基质金属蛋白酶抑制剂1(tissueinhibitorofmetalloprotEInases1,TIMP1)的基因表达情况评判椎间盘退变。结果:与正常组和颈椎病模型组相比,肾虚型颈椎病模型组动物子宫及附件形态萎缩、质量减轻,血清雌二醇含量降低,颈椎间盘组织病理学退变更加明显,Ⅱ型胶原蛋白表达减少,Ⅹ型胶原表达增高,Agc1和Col2a1基因表达降低,MMP13基因表达增高。结论:通过病、证模型复合的方式建立了肾虚型颈椎病模型,肾虚可
3、以加重颈椎间盘的退变。【关键词】肾虚颈椎病病证结合动物疾病模型大鼠Objective:Toestablisharatmodelofcervicalsyndrome(CS)ontholdfemaleSpragueDalydividedintonormalcontrolgroup,CSgroupandCSalcontrolgroupreceivednotreatment,ratsintheCSgroupunderusclesandligamentsasunbalanceddynamicandstaticanimalmodel,andr
4、atsinbinedgroupunderusclesandovariesaskidneydeficiencymodel.Serumandcervicalintervertebraldiscsinedbyobservingthemorphologicchangesofuterusandappendages,detectingtheestradiol(E2).Thedegenerationofintervertebraldiscsinedbydetectingthehistopathology,theexpressionsoftypeⅡc
5、ollagenandtypeⅩcollagenproteins,andtheexpressionsofaggrecan1(Agc1),typeⅡprocollagengene(Col2a1),matrixmetalloproteinase13(MMP13)andtissueinhibitorofmetalloproteinases1(TIMP1)mRNAs.Results:paredalcontrolgroupandCSgroup,theratsinthebinedgroupinishedobviously,theconte
6、ntofserumE2decreased,cervicalintervertebraldiscdegeneratedmoreseriously,typeⅡcollagenproteinexpressiondecreased,typeⅩcollagenproteinexpressionincreased,Agc1andCol2a1mRNAexpressionsinintervertebraldiscdecreased,andtheMMP13mRNAexpressionincreased.Conclusion:Theratmodelof
7、CSe;biningdiseaseandsyndrome;diseasemodel,animal;rats病证结合模型是依据中医临床辨病与辨证相结合的特点复制的动物模型,病证模型具有单纯疾病模型、单纯证候模型所没有的优点,为中西医结合研究开辟了新的途径。本研究依据中医脏腑理论,结合西医学成果,采用疾病模型复合证候模型的方法,将动静力失衡大鼠颈椎间盘退变动物模型与大鼠去卵巢肾虚模型有机地结合起来,建立肾虚型颈椎病的动物模型。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物3月龄SPF级SD雌性大鼠30只,体质量(250±20)g,由上海斯莱
8、克实验动物有限责任公司提供,合格证号为SCXK(沪)20030003。1.1.2主要仪器全自动石蜡包埋机、组织脱水机和轮转式切片机(德国Leica公司,型号分别为EG1160型、TP1020型和RM2135型),光学显