益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制.doc

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1、益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制作者:江建春,李晨光,周泉,卞琴,梁倩倩,崔学军,卢盛,周重建,施杞,王拥军【摘要】  目的:研究益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制。  方法:选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常对照组、肾虚型颈椎病模型组(简称模型组)和益气化瘀补肾方组,每组10只。除正常对照组不施加任何手术外,采用由动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型和去卵巢肾虚模型复合法建立肾虚型颈椎病模型。手术3个月后,益气化瘀补肾方组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。放射免疫法检测血清雌二醇(estradio

2、l,E2)和血浆环磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclicguanosinemonophosphate,cGMP)含量;锥板法检测血液流变学;流式细胞仪检测血小板表面α颗粒膜糖蛋白(alphagranularmembraneprotein,CD62p)表达;HE染色观察颈椎间盘组织病理学改变,免疫组织化学检测颈椎间盘Ⅱ型胶原蛋白表达情况,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应法检测聚集蛋白聚糖(aggrecan1,Agc1)、Ⅱ型前胶原基因(typeⅡprocoll

3、agengene,Col2a1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(tissueinhibitorofmetalloproteinase1,TIMP1)、基质金属蛋白酶13(matrixmetalloproteinase13,MMP13)mRNA表达。  结果:与模型组比较,益气化瘀补肾方组大鼠血清E2含量升高(P<0.05);血浆cAMP、cGMP含量有所升高,但差异无统计学意义;全血低切黏度、低切还原黏度和CD62p表达百分率下降(P<0.05或P<0.01);颈椎间盘退变有所改善,Miyamoto评分下

4、降(P<0.05),Ⅱ型胶原表达增加;Agc1、Col2a1和TIMP1mRNA表达增加(P<0.05,P<0.01),MMP13mRNA表达下降(P<0.01)。  结论:益气化瘀补肾方可通过调节免疫系统、代谢系统、凝血系统和内分泌系统等指标,改善肾虚型颈椎病证候指标,并延缓椎间盘退变。【关键词】益气化瘀补肾方;肾虚;颈椎病;大鼠  Objective:ToresearchtheactionmechanismofYiqiHuayuBushenRecipe(YHBR),acompoundoftradi

5、tionalChineseherbalmedicine,intreatingcervicalsyndrome(CS)withkidneydeficiencyinrats.  Methods:Atotalof30threemontholdfemaleSpragueDawleyratswererandomlydividedintonormalcontrolgroup,CSwithkidneydeficiencymodelgroup(untreatedgroup)andYHBRgroup,with10rats9ineachgro

6、up.Ratsinthenormalcontrolgroupreceivednotreatment,whileratsoftheothertwogroupsunderwentresectionofbothcervicalmusclesandovariestoestablishthemodelofCSwithkidneydeficiency.Threemonthsaftersurgery,ratsintheYHBRgroupwereintragastriclyadministeredYHBRforonemonth.Anothero

7、nemonthlater,allratsweresacrificed.Thecontentofserumestradiol(E2)wasdetectedbyradioimmunoassay;contentsofplasmacyclicadenosinemonophosphate(cAMP)andcyclicguanosinemonophosphate(cGMP)weretested,andtheratioofcAMP/cGMPwasalsocalculated.HemorheologywasdetectedbyWeissenb

8、erg'smethod;expressionofalphagranularmembraneprotein(CD62p)wasdetectedbyflowcytometry;HEstainingwasusedtodetectthehistopathologyof

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