建立sd大鼠痉挛型脑瘫模型的研究

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1、河北医科大学硕士学位论文建立SD大鼠痉挛型脑瘫模型的研究姓名：李亮申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：于亚东201203中文摘要建立SD大鼠痉挛型脑瘫模型的研究摘要目的：目前，国内外关于痉挛型脑瘫动物模型的建立方法的研究较多，但多缺乏模型制作的科学性，导致动物模型症状不典型或症状持续时间较短，成为制约痉挛型脑瘫模型深入研究的瓶颈，使得对痉挛型脑瘫无法进行系统而深入的研究。目前在实验研究中尚无一种理想的痉挛型脑瘫模型可寻。本实验在以往研究的基础上，通过改进和创新，利用脑立体定位仪对大鼠进行牢固的固定，并根据大鼠脑立体定位解剖图谱，对大鼠的锥体束部位进行精确的立体定位，通过微量注射

2、器对大脑锥体束所在部位注射无水乙醇造成锥体束坏死，最大程度的模拟了痉挛型脑瘫的解剖学及病理改变，术后大鼠产生明显的屈曲痉挛症状，且屈肌肌张力增高，症状和体征持续时间较长，稳定性良好。从而建立出一种新的可复制性良好且痉挛持续时间较长的稳定的大鼠痉挛型脑瘫动物模型，为进一步深入的探究痉挛型脑瘫的基础研究和临床诊治打下基础。方法：选择成年雄性SD大鼠16只，按随机数字表法将大鼠分为甲、乙、丙、丁四组，每组4只，甲、乙、丙组为实验组，丁组为对照组。将大鼠用1O％水合氯醛腹腔注射麻醉后固定于脑立体定位仪上，头顶部剪毛备皮，常规消毒铺单，采用颅顶后正中切口，长约2cm，逐层切开皮肤、皮下组织、

3、深筋膜和骨膜，暴露前囟及矢状缝，对照大鼠脑立体定位图谱，选择前囟后8．72mm，矢状缝左侧O．8mm，采用小型电钻在颅顶上钻孔，直径约1mm，将微量注射器垂直向颅内插入9．7mm。甲、乙、丙实验组大鼠分别向颅内缓慢注射51xl、151．tl、25t．tl无水乙醇，充分止血后，用少许骨蜡封住颅骨上的钻孔，生理盐水冲洗后关闭创口。对照组大鼠微量注射器插入颅内9．7mm后，不注射任何试剂，其余操作方法同实验组。术后详细观察对比三组实验组大鼠和对照组大鼠的症状及体征。待三组实验组大鼠症状稳定后(约术后72小时)，取症状最典型的一组中的一只大鼠，麻醉过程同制模过程，将大鼠置于无菌操作台上，常

4、规消毒、铺单，先将大鼠颅顶伤口缝线拆开，清除伤口周围及皮下血肿，按原切口方向分别向前延长切口至鼻尖，向后延长切口至颈部，暴露整个颅骨。用线锯自眼眉中文摘要部位横行锯开，通过颞部向头后锯线在枕外隆突汇合。用峨眉凿自眼眉部横行锯口撬开颅盖骨，用小型咬骨剪在枕骨大孔将椎管剪开，分离脊髓。用显微剪将嗅脑、视神经剪断，用尖刀探入蝶鞍分离脑垂体，连同脑垂体将整个大脑取出，用生理盐水冲洗干净后，放入福尔马林溶液内浸泡3天。将完整的大脑标本做病理分析。其余大鼠均继续正常饲养，每天密切观察其性情和行为等生活情况以及痉挛状态的主要观察指标，包括精神状况、摄食及饮水情况、运动情况、肢体痉挛情况、肢体肌张

5、力和症状持续的时间等。结果：甲组大鼠术后12小时内，无任何主动活动及饮食，精神萎靡，右侧肢体屈曲痉挛，屈肌肌张力较左侧相比增大；术后24小时，有少量活动及饮食，精神状态好转，右侧肢体屈曲痉挛状态持续，主动活动及被动驱赶时均呈顺时针转圈运动，转圈直径约60cm；术后48小时，大鼠饮食情况依然较正常组大鼠差，但主动活动增多，活动及饮食增多，精神状态持续好转，屈曲痉挛症状持续；术后72小时，饮水及摄食渐趋正常，精神状态接近正常，主动活动接近正常，右侧肢体屈曲痉挛症状己稳定，屈曲痉挛状态持续约6．8周。乙组大鼠术后l8小时内，无任何主动活动及饮食，精神萎靡，右侧肢体明显屈曲痉挛，屈肌肌张力

6、较左侧相比显著增大；术后36小时，大鼠开始少量主动摄食及饮水，有少量主动活动，精神状态好转，运动时右侧肢体跛行症状明显，主动活动及被动驱赶时均呈顺时针转圈运动，转圈直径约20cm，屈曲痉挛症状持续；术后48小时，大鼠饮食情况依然较正常组大鼠差，但主动活动增多，摄食及饮水增多，精神状态持续好转，屈曲痉挛症状持续；术后72小时，饮水及摄食渐趋正常，精神状态渐趋接近正常，主动活动接近正常，右侧肢体屈曲痉挛症状已稳定，屈曲痉挛状态持续约8．14周。丙组大鼠术后24小时内无任何主动活动及饮食，精神萎靡，右侧肢体严重屈曲痉挛，屈肌肌张力较对侧明显增大，头及整个身体偏向右侧；术后48小时，仍无任

7、何主动活动及饮食，精神极度萎靡，被动驱赶仅能原地顺时针方向打转，且无法站立，头及整个身体向右侧严重倾斜，屈曲痉挛症状持续；术后72小时，精神极度萎靡，仍无任何主动活动及饮食，身体消瘦明显，屈曲痉挛症状持续；术后1周，因无法站立导致无法正常摄食及饮水，最终丙组大鼠全部死亡。丁组(对照组)大鼠术后24小时内，活动及饮食减少，精神状态差，右中文摘要侧肢体无任何屈曲痉挛症状，两侧肢体屈肌肌张力相同，活动均正常；术后48小时，精神状态恢复可，渐趋正常活动及饮食：术后72小时，完