拟胆碱酯酶测定SOP_PCHE临床意义_检验科生化项目SOP

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1、拟胆碱酯酶测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理丁酰基硫代胆碱（BTC）经PCHE水解后释放出硫代胆碱，硫代胆碱会直接将蓝色染料2，6-二氯酚靛酚（DIP）还原为无色形式。由于DIP消失而在600nm处产生的吸光度变化与PCHE活性成正比，并可通过双波长速率法（600，700）测得。丁酰基硫代胆碱+H2O丁酸+硫代胆碱2-硫代胆碱+DIP二硫代胆碱+DIP-H2（在600nm处吸收）（在600nm处不吸收）2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存室温保存，及时送检。血清在室温环境下可在24h内保持稳定，在冷藏环境下可在60d内保持稳定。2.3注意事项

2、不应使用含有草酸钾或氟化钠的采血管。有报道说BTC对红细胞（真）胆碱酯酶不会起反应，所以部分溶血的标本不应造成干扰，不应使用过度溶血的标本，因为可能无法激活底物损耗错误消息。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~3孔为DIP0.06umol/L，缓冲液，片剂；4~6孔为BTC1.0umol/L，片剂。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器拟胆碱酯酶测定文件编号：版本号：页码：第页共页SIEMENSDIMENSI

3、ONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使

4、用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存每瓶加2.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min,即

5、可使用。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7

6、：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序拟胆碱酯酶测定文件编号：版本号：页码：第页共页6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0~14000U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间

7、7000~19000U/L。9临床意义与其他酶活性增高反映病理改变的情况相反，血清胆碱脂酶测定的临床意义在于酶活性降低。肝脏合成PChE，故肝实质细胞损害时CHE活性降低。有机磷毒剂是AChE及PchE的强烈抑制剂，测定血清CHE与测定全血CHE一样，是协助有机磷中毒诊断及预后估计的重要手段。10参考文献[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司拟胆碱酯酶（PCHE）测定试剂说明书。[2]叶应妩，王毓三，申子瑜