利用反相高效液相色谱(rp-hplc)分析和制备多肽

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1、利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析和制备多肽常州工程职业技术学院毕业设计报告(论文)(2009届)系别:制药与生物工程技术系课题名称:利用反相高效液相色谱分析和制备多肽指导教师:郝志芳班级:化学制药0611班学生姓名:刘骏摘要随着现代生物技术的发展,出现了各种多肽类药物,多肽在临床医学中有巨大的应用价值。自从发明固相法化学合成多肽以来,有关各种活性多肽的化学合成有了很大发展[1],但产物成分比较复杂,一般是以目标多肽为主的几种结构相似的多肽混合物,因此,对其分离纯化的最优化研究就显得格外重要。此外,

2、提供高纯度的多肽样品,对于其物化性质、生物活性及其医药功能的研究具有重要的作用。从现代分离科学理论得出,色谱和电泳是目前所知的分离效果最佳的两种方法。电泳仅能用于分离而不能用于多肽的制备[2~4]。反相高效液相色谱(RP-HPLC)具有分离效果好、分辨率高、回收率高的特点,在多肽的分离纯化和制备中备受青睐,因此,RP-HPLC是目前分离纯化和制备多肽的主要手段[4~9]。本文拟用RP-HPLC对化学固相合成的多肽进行分离和制备。关键词:多肽;反相高效液相色谱;分离;制备IAbstractAsthedevel

3、opmentofmodernbiologicaltechnology,manypeptidemedicineshavebeeninventedandproduced.Inthefieldoftheclinicalmedicine,thepeptideholdsthemassivevalue.Sincetheinventionofthesolidphasesynthesis,chemicalsynthesisrelatedagreatnumberofactivatedpeptidehasskyrocketad

4、vancement[1].However,theproductioncontainscertainimpuritieswhichhavethesimilarstructureascontrastthetargetpeptide,therefore,itisimportantthattheoptimizationresearchofthepurification.Andthen,highpuritypeptidealsocanhelptheresearchofthephysicalandchemicalcha

5、racter,biologicalactivityandmedicamentfunction.Wecanconcludethatthechromatographyandelectrophoresisarethebestisolationeffectmethodsatpresent.Nevertheless,theelectrophoresisonlyusethequalitativeexperimentsnotpreparation[2~4].RP-HPLCholdshighisolation,resolu

6、tionandrecycleratio.Astheupwardreasons,RP-HPLCisthemajormethodofthepeptidepurificationinthisworld[4~9].KeyWords:Peptide;RP-HPLC;Separation;PreparationII目录1前言与文献综述………………………………………………………11.1HPLC简介…………………………………………………………………………11.1.1HPLC起源……………………………………………………………

7、……11.1.2HPLC发展……………………………………………………………21.1.3HPLC前景……………………………………………………………31.1.4HPLC原理……………………………………………………………41.1.5RP-HPLC的应用与优点…………………………………………51.2多肽的简介……………………………………………………………61.2.1多肽的合成方法……………………………………………………………61.2.2多肽的应用……………………………………………………………72多肽的纯化实验………

8、………………………………………………102.1仪器以及用具………………………………………………………102.2试剂………………………………………………………………102.3实验方案………………………………………………………103结果与讨论………………………………………………………123.1粗肽的RP-HPLC分析…………………………………………………123.2粗肽的RP-HPLC制备………………………………………

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