东海海参胶原蛋白酶解工艺研究

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1、第9卷第3期中国食品学报Vo1．9No．32009年6月JoumalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology———东海海参胶原蛋白酶解工艺研究傅玉颖陈卉卉励建荣于平徐敏(浙江工商大学食品与生物工程学院杭州310035)摘要主要研究从东海海参中提取胶原蛋白的工艺以及胶原蛋白酶解的条件优化。以干东海海参为原料．采用酸碱溶液浸泡除去东海海参表面的钙质及非胶原物质，然后在酸性条件下用1％胃蛋白酶进行水解．提取胶原蛋白；分别探讨木瓜蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白的最佳条件。结果

2、表明：木瓜蛋白酶最适条件：底物含量30g，g酶，温度40℃，pH7．5；风味蛋白酶最适条件：底物含量40g，g酶，温度40℃，pH7．5；胰蛋白酶最适条件：底物含量40g／g酶，温度55oC，pH9．0。复合酶水解的最佳工艺：风味蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比1：1，木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的质量比3：1，风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比l：1。关键词东海海参胶原蛋白水解文章编号1009—7848(2009)03—0084—08海参属棘皮动物f1(Echinodermata)．海参纲左旋ot链相互缠绕构成胶原的右手复合螺旋结(Holot

3、huroidea)，又名海黄瓜、沙噗。海参种类很构[41。这种特殊的结构，使得它在体内的结合十分多，可供食用的品种有梅花参、刺参、乌参、光参、牢固，不易分离出来。另外，胶原蛋白属不完全蛋瓜参、玉足参等20多种『11。海参的营养十分丰富，白，含有18种常见氨基酸．富含其它蛋白质所没位于海产品“八珍”之首。是滋补强身的名贵佳品有或含量很少的羟脯氨酸．使得其具有较强的持及防治一些疾病的良药。海参体壁是主要的食用水能力．能够应用于各个领域。或药用部位。干燥体壁的有机成分中蛋白质含量本文以干东海海参为原料．研究提取胶原蛋高达90％。对

4、其结构的研究表明，海参蛋白以胶原白的工艺，探讨风味蛋白酶、木瓜蛋白酶[51和胰蛋蛋白为主，是除猪皮、牛皮以外获得胶原蛋白的另白酶酶解胶原蛋白的最佳工艺条件。一重要来源[21。东海海参(AcaudinamolpadioidesSemper)属1材料与方法芋参目(Molpadida)尻参科(Caudinidae)，俗称香1．1材料参。其盛产于亚热带沙质海区，尤以我国东海区资东海海参，宁海县东部海洋经济开发有限公源丰富，目前的蕴藏量约lOt，每年捕获量约3000t。司；风味蛋白酶(酶活力204U／mg)、胰蛋白酶(酶鉴于东海海参营

5、养丰富，自然储量大，价格较低，活力262U／g)、胃蛋白酶(酶活力3000～3500可以将其中的活性成分——胶原蛋白提取出来．NFU／mg)、木瓜蛋白酶(52U／mg)，均为Sigma公司开发其内在潜力，提高自身的经济价值。产品。胶原蛋白是一类白色、不透明、无支链的纤维1．2仪器与设备型蛋白质，大量存在于动物体内131，呈3股螺旋结紫外一可见光分光光度计(UV一2550)，日本构。这3条多肽链均形成左手螺旋结构，再以氢键SHIMADZU；超低温冰箱(Forma一86C)，Thermo相互咬合成牢固的右手超螺旋结构。胶原特有的

6、ElectronCorporation：循环水式多用真空泵(SHB一ⅢA)，上海豫康科教仪器设备有限公司；旋转蒸发器(201型，配有单相电容运转电动机)，上海申科收稿日期：2009—01—06机械研究所；真空干燥箱(DZG一6090)，上海森信作者简介：傅玉颖，男，I966年出生，博士生，副教授实验仪器有限公司；超声波清洗器(KQ一100)，昆第9卷第3期东海海参胶原蛋白酶解工艺研究85山市超声仪器有限公司。光度值换算为蛋白质质量浓度，计算水解度。1．3试验方法D(％)=(Cx2)／(Wx106)×(1／V2)xl00l-3

7、．1胶原蛋白的制备取干东海海参样品，自式中：C一一通过吸光度值换算的蛋白质质量来水浸泡2～3d后，用1％HC1(1：10，)浸泡2~3浓度，mg／L；——胶原蛋白质量，g；V——水解d，间歇搅拌，24h换一次溶液。去离子水冲洗至液的总体积，mL；厂显色时所吸取的水解液体pH6～7，然后用0．03％Ca(OH)2(1：10，v／v)浸泡积．mL23d．间歇搅拌．24h换一次溶液，用去离子水清洗至pH中性嘲。2结果与分析将前处理过的东海海参浸泡在8％NaOH(1：2．1胶原蛋白水解标准曲线l0，)溶液中15min，至东海海参体壁

8、呈透明由图1可得吸光值与胶原蛋白质量浓度的关状，将其捞出，用去离子水冲洗多次。将处理好的系式y=O．0146x-0．4377．R=0．9959。胶原蛋白质东海海参切碎匀浆，用胃蛋白酶于0．1mol／L醋酸量浓度与吸光值呈良好的线性关系。溶液中限制性酶解2d，温度控制在l0℃以下，间隔6h搅