smaf1基因的异位过表达对脂肪细胞3t3l1增殖和凋亡的影响

《smaf1基因的异位过表达对脂肪细胞3t3l1增殖和凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3L1增殖和凋亡的影响作者：韩威段佳慧吴民泸林泽超刘彦华【摘要】目的观察一脂肪细胞特异性表达的新基因小脂肪细胞因子1(SMAF1)在小鼠脂肪前体细胞3T3L1中的异位表达对脂肪细胞增殖和凋亡的影响。方法构建小鼠SMAF1真核表达载体并稳定转染3T3L1脂肪前体细胞以获得永久异位表达SMAF1基因的细胞株，使用Westernblot证实SMAF1基因的表达。体外培养SMAF13T3L1脂肪细胞，以MTT法检测SMAF13T3L1脂肪细胞的增殖;用流式细胞仪对SMAF13T3L1脂肪细胞

2、进行凋亡分析。结果与对照相比，SMAF13T3L1脂肪细胞增殖明显降低，差异有统计学意义(P<0.05);而SMAF13T3L1脂肪细胞凋亡分析结果与对照无显著性差异。结论SMAF1基因在3T3L1中的异位性表达，对3T3L1前体脂肪细胞生长增殖有显著的抑制作用，而对细胞凋亡无影响，提示SMAF1在脂肪细胞增殖分化中发挥一定的作用。【关键词】SMAF1;脂肪细胞;异位表达;增殖;凋亡【Abstract】ObjectiveToevaluatetheeffectofanoveladipocytespecificexpres

3、sedgenesmalladipocytefactor1(SMAF1)onproliferationandapoptosisofpreadipcyte3T310L1.MethodsApermanentSMAF1expressionconstructwasestablishedforstabletransfectionof3T3L1andformationofSMAF13T3L1cellline.Afterinvitroculturingofcells,bothMTTmethodandflowcytometrywereusedto

4、detectandanalyzetheproliferationlevelandapoptosisprogressrespectively.ResultsComparedwithcontrolgroups,SMAF13T3L1celllineshowedremarkablereductioninproliferationwithstatisticalsignificance(P<0.05),whilenonotabledifferenceinapoptosisbetweentwocelllines.ConclusionThee

5、ctopicexpressionofSMAF1in3T3L1preadipocytemightsuppressproliferationwithoutinterferingapoptosisprocess.【Keywords】smalladipocytefactor1;preadipocytes;ectopicexpression;proliferation;apoptosis　　肥胖症与遗传、中枢神经系统异常、内分泌功能紊乱、代谢因素和营养因素不平衡等密切相关。1994年Zhang等成功克隆了肥胖基因(obgene，现称为瘦素基因

6、)，并发现其表达产物瘦素(leptin)[1];1995年，Tartaglia等成功克隆了瘦素受体基因。迄今为止已陆续发现了许多对肥胖有决定作用的基因[2]。2005年，Ronald10Kahn等发现了褐色脂肪细胞早期发育所必需的基因网络(374个基因)，并进一步证实了在胰岛素信号和褐色脂肪细胞控制之间存在着联系，这一基因网络的完整构成的发现，为肥胖症和糖尿病的临床检验和治疗提供了一个重要蓝图[3]。最近研究显示，在小鼠脂肪组织基因芯片筛选中，发现了一个异于其他蛋白质家族的具有约700碱基对/80氨基酸序列的潜在肥胖基因SMAF1——

7、小脂肪细胞因子1(smalladipocytefactor1)[4]。SMAF1基因仅在脂肪细胞中特异性表达，在大鼠和小鼠培养的原代脂肪前体细胞中表达缺失;SMAF1基因表达和脂肪细胞基因表型呈现密切相关;不仅如此，SMAF1基因在脂肪细胞中的mRNA水平和脂肪细胞成熟分化程度呈正相关。但目前对SMAF1基因在脂肪细胞增殖和凋亡过程中所起的作用尚不清楚。本研究主要以SMAF1基因在体外前体脂肪细胞中的异位性表达来阐明SMAF1基因对脂肪细胞增殖和凋亡的影响。　　1材料与方法　　1.1材料前体脂肪细胞3T3L1购自美国American

8、TypeCultureCollection(ATCC)公司。DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶均购自美国GIBCO公司。胰岛素、地塞米松、12甲基22异丁基黄嘌呤(MIX)、G418购自德国Sigma公司。pCNLX