新型cpg odn增强乙肝疫苗诱导igg2a类抗体产生的实验研究①

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1、新型CpGODN增强乙肝疫苗诱导IgG2a类抗体产生的实验研究①【摘要】目的：寻找能增强乙肝疫苗刺激IgG2a类抗体产生，使机体处于Th1样免疫环境的新型乙肝疫苗佐剂。方法：选用自行设计的A、B、C型CpGODN，并以发表的A、B型CpGODN作为阳性对照，与重组乙肝疫苗混合后于第0、4周免疫BALB/c小鼠，用ELISA法检测免疫小鼠血清中HBsAb水平及种类。结果：各型CpGODN都能增强乙肝疫苗刺激HBsAb的产生水平，CpGODN+乙肝疫苗免疫的小鼠血清中HBsAb类型为IgG2a>>IgG1，而单独应用商品化重

2、组乙型肝炎疫苗的小鼠血清中HBsAb类型为IgG1>>IgG2a。结论：各型CpGODN对重组乙型肝炎疫苗［含Al(OH)3佐剂］均具有增效作用，而且可以诱导机体产生倾向于Th1途径的免疫应答反应。【关键词】CpGODN；乙型肝炎疫苗；佐剂；IgG2aStudyofNewCpGODNsonenhancementofIgG2aproductioninducedbyhepatitisBvaccineCONGZhongYi,BAOMuSheng,WANMin,WANGLi,LIDaPeng,WANGLiYing,YUY

3、ongLi.DepartmentofImmunologyandDepartmentofMolecularBiology,TheSchoolofBasicMedicalSciencesofJilinUniversity,Changchun130021,China［Abstract］Objective:TosearchfornewadjuvantforhepatitisBvaccinethatcouldstimulatetheproductionofIgG2aandinduceTh1likeimmunecircumsta

4、nce.Methods:BALB/cmicewereimmunizedwithrecombinanthepatitisBvaccineonlyorcombinedwithCpGODNsdesignedbyourlab(includingtypeA,BandC)andCpGODNspublishedinarticlesat0thand4thweek.TheHBsAblevelandtheIgGsubsetsintheserumofmiceweremeasuredbyELISA.Results:AlltypesofCpGOD

5、NcouldenhancetheproductionofHBsAbstimulatedbyhepatitisBvaccine.ThelevelofIgGsubsetsofmiceimmunizedwithhepatitisBvaccinecombinedwithCpGODNwasIgG2a>>IgG1,andthatofmiceimmunizedwithhepatitisBvaccineonlywasIgG1>>IgG2a.Conclusion:AlltypesofCpGODNcanenhancetheeffectofr

6、ecombinanthepatitisBvaccineandinduceTh1likeimmuneresponse.［Keywords］CpGODN；HepatitisBvaccine；Adjuvant；IgG2a细菌DNA和合成的含有非甲基化免疫刺激性CpG基序的寡聚脱氧核糖核酸（CpGoligodeoxynucleotides,CpGODN）能作用于淋巴细胞、单核细胞和树突状细胞，刺激其增生、成熟以及分泌多种细胞因子、趋化因子和/或免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）［1］。具有免疫刺激性的CpGODN

7、至少有3种不同的类型：A型CpGODN能强烈激活天然杀伤细胞，以及诱导浆细胞样树突状细胞前体表达α干扰素。在结构上，A型CpGODN的内部具有通过磷酸二酯键连接的含有CpG的回文序列，并且其3′和5′末端有磷酸硫代修饰的polyG（硫代修饰：磷酸二酯键中与磷原子结合的一个氧原子被硫原子代替，此修饰使CpGODN能够抵抗DNA酶的作用，在体内半衰期延长，因A型CpGODN全部硫代修饰会影响其免疫刺激活性，故仅将其3′和5′末端的碱基进行硫代修饰）。与A型CpGO

8、DN相比，B型CpGODN在结构上具有全硫代修饰的骨架，含有一个或多个CpG基序，没有polyG。B型CpGODN能刺激B细胞的增生和促进抗原提呈细胞的分化。C型CpGODN兼有A型CpGODN和B型CpGODN的作用，既能刺激浆细胞样树突状细胞前体产生α干扰素，又能刺激B细胞增生。C型CpGODN的结