肠胃清对多药耐药人口腔表皮癌细胞kb

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1、肠胃清对多药耐药人口腔表皮癌细胞KB【摘要】目的观察中药复方肠胃清口服液对肿瘤多药耐药的逆转作用，以及对瘤组织和正常组织中化疗药物分布的影响，探讨中药增效减毒的作用机制。方法将具有多药耐药表型的人口腔表皮癌细胞株kb-a-1皮下注射接种于裸小鼠右侧腋下，随机分为5组:空白对照组，肠胃清组，阿霉素组，阿霉素+低浓度肠胃清实验药物组，阿霉素+肠胃清高浓度实验药物组。肿瘤称重、hplc分析、流式细胞仪检测各组药物的抑瘤率、阿霉素在肿瘤组织与肝肾中的分布及肿瘤细胞的凋亡率。结果阿霉素和肠胃清单独给药均不能抑制肿瘤组织的生长，阿霉素与肠胃清联合治疗能显著减少肿瘤组织的重量，增加肿瘤组织内的阿霉

2、素浓度，诱导肿瘤细胞发生凋亡。阿霉素与肠胃清联合治疗没有影响肝脏和肾脏组织阿霉素浓度。结论肠胃清在不影响正常组织阿霉素浓度的同时，通过增加阿霉素在肿瘤细胞内的积累而增强阿霉素的细胞毒性，从而抑制肿瘤组织的生长，逆转肿瘤的耐药。　　【关键词】肠胃清口服液;人口腔表皮癌细胞kb-a-1;多药耐药　　effectofchangorandnormaltissue　　kongling-，shanghai200062，china　　【abstract】objectivetoobservetheeffectofchangulitdrugresistanceandtheeffectonconcent

3、rationofdox（doxorubicin）intumorandnormaltissue.methodsthehumanoralepider-moidcarcinomacelllineskb-a-1，ulitdrugresistance，ice，izedinto5groups:controlgroup，cormassesorinhibitionratesorandnormaltissue（liversandkidneys）anceliquidchromatography;theapoptoticrateofcancercellsetry.resultsthegroorsormas

4、sesallerindoxpluscorandtheapoptoticrateincancercellorandreversemulitdrugresistanceoftumorbyincreasingtheconcentrationofdoxintumor，altissuesdidn'tchange.　　【keyanoralepidermoidcarcinomakb-a-1;mulitdrugresistance　　多药耐药（multidrugresistance，mdr）是肿瘤化学治疗提高疗效的最大障碍，许多化疗增敏剂在提高疗效的同时，往往存在严重的毒副作用，限制了临床应用［1］

5、。.cOm许多研究表明，中医药在辅助化疗药治疗恶性肿瘤时，一方面可增强化疗药的治疗效果，另一方面可减轻化疗药的毒副作用，其机制尚未被完全阐明，是否对肿瘤组织和正常组织中化疗药分布有不同的影响尚未见报道［2］。我们既往的研究表明，中药复方肠胃清口服液可抑制移植瘤的生长，并可明显提高小鼠脾脏及胸腺指数［3］，本研究建立多药耐药移植瘤模型，重点观察肠胃清对化疗药的增效作用，以及对瘤组织和正常组织中化疗药分布的影响，阐明肠胃清增效减毒的作用机制。　　1材料与方法　　1.1材料细胞株:kb-a-1是人口腔表皮癌耐药细胞系。此细胞株由irapastan博士和micheal.m.gottesman

6、博士馈赠（nationalinstitutesofhealth，usa）。细胞置于培养箱，在37℃，5%co2+95%空气条件下培养。培养基为dmem，加入10%小牛血清，加入氨苄青霉素、硫酸链霉素至终浓度各100u/ml，培养基中加入1.0μg/ml阿霉素（dox-orubicin，dox）。动物:blab/cnu/nu裸小鼠，雄性，4～6周龄，由中国科学院上海实验动物中心提供，按照spf条件饲养。肠胃清口服液由黄芪、党参、白术、石见穿、野葡萄藤等药物组成，由上海中医药大学附属普陀医院制剂室提供，生药浓度为1.33g/ml。　　1.2人表皮癌细胞kb-a-1异种移植模型的建立［4］

7、单层培养细胞用胰蛋白酶消化，用pbs悬浮混匀至约3×107cells/ml，以5×106cells/0.2ml浓度皮下注射接种于裸小鼠右侧腋下，3周后，处死动物，迅速将肿瘤组织解剖下来，剪碎，通过网筛过滤，用pbs吹打成2×107cells/ml细胞悬液，以2×106cells/0.1ml浓度皮下注射接种于裸小鼠右侧腋下，当肿瘤组织生长到5mm×5mm大小时开始给药处理。　　1.3动物分组及治疗方法将上述长有肿瘤的裸小鼠随机分为5组，每组6只，分别是:①空