舒林酸对卵巢癌skov3细胞作用的初步研究

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1、舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞作用的初步研究：苏丽，孙晓雷，王春，贲志云，苏敏【摘要】　　目的：研究舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞的生长和细胞运动的影响以及对基质金属蛋白酶2（MMP2）、环氧合酶-2(COX-2)表达的影响：方法：将不同浓度的舒林酸加入培养液中观察其对SKOV3细胞形态的影响，采用MTT法观察舒林酸对SKOV3细胞生长的影响，通过划痕试验观察舒林酸对SKOV3细胞运动的影响，利用免疫细胞化学方法研究舒林酸对SKOV3细胞MMP2、COX-2表达的影响。结果：舒林酸与SKOV3细胞体外培养可使肿瘤细胞伪足回缩、细胞变圆，MTT试验提示舒林酸可抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长，划痕

2、试验提示舒林酸可抑制SKOV3细胞的运动，免疫细胞化学实验提示舒林酸显著抑制SKOV3细胞MMP2、COX-2的表达，有时间和剂量依赖效应。结论：舒林酸可能通过抑制MMP2、COX-2的表达而抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长和运动。【关键词】卵巢癌舒林酸基质金属蛋白酶2环氧合酶-2　　[Abstracts]Objective:ToinvestigatetheeffectsofsulindaconthegrootilityofovariancancercellSKOV3anditsinvolvedmechanism.Methods:Inordertodetecttheeffectsofsuli

3、ndaconculturedSKOV3,sulindacorphologyofSKOV3icroscopy.MTTcolorimetricassayinedbyscarificationassay.TheeffectsofsulindaconexpressionofMMP2andCOX-2munohistochemistry.Results:SulindaccouldmakeSKOV3beeroundandinhibititsgrootility.Expressionsofmatrixmetalloproteinase2(MMP2)andcyclooxygenase-2(COX-2)inS

4、KOV3e-dependentpattern.Conclusions:SulindaccaninhibitgrootilityofSKOV3,andthemechanismmayberelatedtothedoa;Sulindac;Matrixmetalloproteinase2;Cyclooxygenase-2　　舒林酸属于非甾体抗炎药(nonsteroidalanti-inflammatorydrugs,NSAIDs),是临床上常用合成的抗炎镇痛药。大量的流行病学资料提示长期服用NSAIDs可以降低卵巢癌[1，2]、乳腺癌、前列腺癌、肠癌、胃癌[3]、肺癌等[4]多种肿瘤的发生。但对于

5、卵巢浆液性囊腺癌方面的研究较少，其作用机制也不清楚。本研究旨在探讨舒林酸对卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞生长和细胞运动的关系及其对SKOV3细胞表达基质金属蛋白酶2（matrixmetalloproteinase2，MMP2）、环氧化酶（cyclooxygenase-2,COX-2）的影响。　　1材料与方法　　1.1细胞和试剂人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3和舒林酸由复旦大学附属妇产科医院丰有吉教授惠赠。RPMI1640细胞培养基购自Gibco公司，小牛血清购自四季青生物工程公司，ABC免疫组化试剂盒购自华美生物工程有限公司产品，鼠抗人MMP2、COX-2单克隆抗体为CellSignal

6、ing产品。　　1.2试验方法　　1.2.1细胞接种培养与加药将处于对数生长期的卵巢癌SKOV3细胞稀释为单细胞悬液，以含10％小牛血清的RPMI1640培养液调整细胞浓度至2×106/ml，加入24孔培养板中，每孔2ml，共12孔，待细胞贴壁后，加入不同浓度的以DMSO溶解的舒林酸，使每孔的舒林酸终浓度分别为100μmol/L、200μmol/L，每个浓度设4个复孔，另2孔加0.1％DMSO作为对照，不加药的2孔为阴性对照组。以2.8％的碳酸氢钠调节培养液pH，以排除舒林酸使培养液酸化可能对细胞生长产生影响。将细胞置于含5％CO2的培养箱中37℃分别培养24h、48h，用倒置相差显微镜观

7、察。　　1.2.2MTT细胞增殖试验以上每孔加入MTT20μl，培养4h，弃上清液，每孔再加入DMSO150μl室温放置30min，以酶标仪选择490nm波长测定各孔平均光密度值（OD值）。　　1.2.3划痕试验将SKOV3细胞接种于24孔板内培养，待细胞基本铺满，用tip头在培养板内纵向划痕，形成培养细胞缺损区域带，划痕后PBS洗2次，分别加入以DMSO溶解的100μmol/L、200μmol/L舒林酸继续培养，对照组