舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞作用的初步研究.doc

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1、舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞作用的初步研究作者:苏丽,孙晓雷,王春,贲志云,苏敏【摘要】  目的:研究舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞的生长和细胞运动的影响以及对基质金属蛋白酶2(MMP2)、环氧合酶-2(COX-2)表达的影响:方法:将不同浓度的舒林酸加入培养液中观察其对SKOV3细胞形态的影响,采用MTT法观察舒林酸对SKOV3细胞生长的影响,通过划痕试验观察舒林酸对SKOV3细胞运动的影响,利用免疫细胞化学方法研究舒林酸对SKOV3细胞MMP2、COX-2表达的影响。结果:舒林酸与SKOV3细胞体外培养可使肿瘤细胞伪足回缩、细胞变圆,MTT试验提示舒林酸可抑制卵巢癌S

2、KOV3细胞的生长,划痕试验提示舒林酸可抑制SKOV3细胞的运动,免疫细胞化学实验提示舒林酸显著抑制SKOV3细胞MMP2、COX-2的表达,有时间和剂量依赖效应。结论:舒林酸可能通过抑制MMP2、COX-2的表达而抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长和运动。【关键词】卵巢癌舒林酸基质金属蛋白酶2环氧合酶-2  [Abstracts]Objective:ToinvestigatetheeffectsofsulindaconthegrowthandmotilityofovariancancercellSKOV3anditsinvolvedmechanism.Methods:In

3、ordertodetecttheeffectsofsulindaconculturedSKOV3,sulindacwithdifferentconcentrationanduntreatedcontrolweresetup.ThechangesinmorphologyofSKOV3wereobservedbyphasecontrastmicroscopy.MTTcolorimetricassaywasusedtostudytheeffectsofsulindaconSKOV3cellgrowth.MotilityofSKOV3wasdeterminedbyscarifi

4、cationassay.TheeffectsofsulindaconexpressionofMMP2andCOX-2weredetectedbyimmunohistochemistry.Results:SulindaccouldmakeSKOV3becomeroundandinhibititsgrowthandmotility.Expressionsofmatrixmetalloproteinase2(MMP2)andcyclooxygenase-2(COX-2)inSKOV3wereinhibitedbysulindacinadose-andtime-dependen

5、tpattern.Conclusions:SulindaccaninhibitgrowthandmotilityofSKOV3,andthemechanismmayberelatedtothedown-regulationofMMP2andCOX-2expressions.  [Keywords]Ovariancarcinoma;Sulindac;Matrixmetalloproteinase2;Cyclooxygenase-2  舒林酸属于非甾体抗炎药(nonsteroidalanti-inflammatorydrugs,NSAIDs)5,是临床上常用合成的抗炎镇痛药

6、。大量的流行病学资料提示长期服用NSAIDs可以降低卵巢癌[1,2]、乳腺癌、前列腺癌、肠癌、胃癌[3]、肺癌等[4]多种肿瘤的发生。但对于卵巢浆液性囊腺癌方面的研究较少,其作用机制也不清楚。本研究旨在探讨舒林酸对卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞生长和细胞运动的关系及其对SKOV3细胞表达基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase2,MMP2)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)的影响。  1材料与方法  1.1细胞和试剂人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3和舒林酸由复旦大学附属妇产科医院丰有吉教授惠赠。RPMI1640细胞培养基

7、购自Gibco公司,小牛血清购自四季青生物工程公司,ABC免疫组化试剂盒购自华美生物工程有限公司产品,鼠抗人MMP2、COX-2单克隆抗体为CellSignaling产品。  1.2试验方法  1.2.1细胞接种培养与加药将处于对数生长期的卵巢癌SKOV3细胞稀释为单细胞悬液,以含10%小牛血清的RPMI1640培养液调整细胞浓度至2×106/ml,加入24孔培养板中,每孔2ml,共12孔,待细胞贴壁后,加入不同浓度的以DMSO溶解的舒林酸,使每孔的舒林酸终浓度分别为100μmol/L、200μmol/L,每个浓度设4个复孔,另2孔加0.

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