临床医学毕业论文舒林酸对卵巢癌skov3细胞作用的初步研究

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1、舒林酸对卵巢癌SK0V3细胞作用的初步研宄姓名：2014年6月25日舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞作用的初步研究作者：苏丽，孙晓雷，王春，贲志云，苏敏【摘要】目的：研究舒林酸对卵巢癌SKOV3细胞的生长和细胞运动的影响以及对基质金属蛋白酶2(MMP2)、环氧合酶-2(COX-2)表达的影响：方法：将不同浓度的舒林酸加入培养液中观察其对SK0V3细胞形态的影响，采用MTT法观察舒林酸对SK0V3细胞生长的影响，通过划痕试验观察舒林酸对SK0V3细胞运动的影响，利用免疫细胞化学方法研宂舒林酸对SKOV3细胞MMP2、C0X-2表达的影响。结果：舒林酸与SK0V3细胞体外培养可使肿瘤细胞伪足回缩、

2、细胞变圆，MTT试验提示舒林酸可抑制卵巢癌SK0V3细胞的生长，划痕试验提示舒林酸可抑制SK0V3细胞的运动，免疫细胞化学实验提示舒林酸显著抑制SK0V3细胞MMP2、C0X-2的表达，有时间和剂量依赖效应。结论：舒林酸可能通过抑制MMP2、COX-2的表达而抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长和运动。【关键词】卵巢癌舒林酸基质金属蛋白酶2环氧合酶-2[Abstracts]Objective:ToinvestigatetheeffectsofsulindaconthegrowthandmotilityofovariancancercellSKOV3anditsinvolvedmechanism.

3、Methods:InordertodetecttheeffectsofsulindaconculturedSKOV3,sulindacwithdifferentconcentrationanduntreatedcontrolweresetup.ThechangesinmorphologyofSKOV3wereobservedbyphasecontrastmicroscopy.MTTcolorimetricassaywasusedtostudytheeffectsofsulindaconSKOV3cellgrowth.MotilityofSKOV3wasdeterminedbyscarifi

4、cationassay.TheeffectsofsulindaconexpressionofMMP2andCOX-2weredetectedbyimmunohistochemistry.Results:SulindaccouldmakeSKOV3becomeroundandinhibititsgrowthandmotility.Expressionsofmatrixmetalloproteinase2(MMP2)andcyclooxygenase-2(COX-2)inSKOV3wereinhibitedbysulindacinadose-andtime-dependentpattern.C

5、onclusions:SulindaccaninhibitgrowthandmotilityofSKOV3,andthemechanismmayberelatedtothedown-regulationofMMP2andCOX-2expressions.[Keywords]Ovariancarcinoma;Sulindac;Matrixmetalloproteinase2;Cyclooxygenase-2舒林酸属于非甾体抗炎药(nonsteroidalanti-inflammatorydrugs，NSAIDs),是临床上常用合成的抗炎镇痛药。大量的流行病学资料提示长期服用NSAIDs可以降

6、低卵巢癌［1，2］、乳腺癌、前列腺癌、肠癌、胃癌［3］、肺癌等［4］多种肿瘤的发牛.。但对于卵巢浆液性囊腺癌方面的研究较少，其作用机制也不清楚。木研究旨在探讨舒林酸对卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞生长和细胞运动的关系及其对SKOV3细胞表达基质金属蛋0酶2(matrixmetalloproteinase2，MMP2)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)的影响。1材料与方法1.1细胞和试剂人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3和舒林酸由复旦大学附属妇产科医院丰有吉教授惠赠。RPMI1640细胞培养基购白Gibco公司，小牛血清购自四季青生物工程公司，ABC免疫组化试剂盒购自

7、华美生物工程有限公司产品，鼠抗人MMP2、COX-2单克隆抗体为CellSignaling产品。1.2试验方法1.2.1细胞接种培养与加药将处于对数生长期的卵巢癌SKOV3细胞稀释为单细胞悬液，以含10%小牛血清的RPMI1640培养液调整细胞浓度至2xl06/ml,加入24孔培养板中，每孔2ml，共12孔，待细胞贴壁后，加入不同浓度的以DMSO溶解的舒林酸，使每孔的舒林酸终浓度分别为100(imol/L、200

8、imo